羅氏沼蝦促性腺激素的分離純化及其生理功能檢測.pdf_第1頁
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1、本實驗以羅氏沼蝦為研究對象,首先對其卵黃磷蛋白進行了純化和多克隆抗體的制備,并且對其抗體進行了效價測定和免疫檢測。結(jié)果表明,ELISA法確定抗體效價達1:20,000。免疫印跡結(jié)果顯示該抗體與日本沼蝦卵巢蛋白存在免疫交叉反應,與羅氏沼蝦肌肉抽提液及斑節(jié)對蝦卵巢蛋白不存在免疫交叉反應。說明制備的抗體具有特異性,能有效用于檢測Vn的含量;并且證明羅氏沼蝦與日本沼蝦卵巢蛋白存有一定同源性,與斑節(jié)對蝦卵巢蛋白差別較大?! ±弥苽涞腣n抗體以

2、及免疫沉淀的方法,對該蝦腦抽提液的SephadexG-50凝膠過濾層析及其高壓液相色譜層析(HPLC)的組分進行活性檢測。同時比較了卵巢發(fā)育至Ⅲ期及其卵巢完全未發(fā)育的蝦腦層析波譜。結(jié)果表明,處于性腺發(fā)育期的蝦腦的小分子蛋白組分比未發(fā)育期蝦腦的相應組分更為復雜。在HPLC之后得到的9個含量較高的蛋白峰之中,峰Ⅲ能夠非常顯著地特異性地促進Vn的合成?! ∧壳埃瑢τ诹_氏沼蝦的研究多集中在細胞學及其激素分泌,電生理學研究缺乏。利用全細胞膜片鉗

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