18772.基于熒光信號(hào)放大策略檢測(cè)生物大分子和汞離子

1、碩士學(xué)位論文論文題目論文題目基于熒光信號(hào)放大策略檢測(cè)生物大分子和汞離子分類號(hào)0657.1單位代碼10447密級(jí)無(wú)研究生學(xué)號(hào)1210120206作者姓名呂燕芹呂燕芹專業(yè)名稱分析化學(xué)分析化學(xué)指導(dǎo)教師姓名劉繼鋒劉繼鋒教授教授學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院論文提交日期2015年4月聊城大學(xué)碩士學(xué)位論文i摘要近年來(lái)，在臨床診斷、食品安全和環(huán)境保護(hù)等各個(gè)社會(huì)領(lǐng)域中，對(duì)生物分子的超靈敏檢測(cè)要求越來(lái)越高，構(gòu)建更為靈敏、精確、經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)單的檢測(cè)策略已成為生命

2、分析科學(xué)領(lǐng)域中研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)。生物分子信號(hào)放大技術(shù)是利用各種工具酶和納米顆粒等手段發(fā)展起來(lái)的一種前沿的分析技術(shù)，可對(duì)生物分子進(jìn)行快速、靈敏檢測(cè)。本論文利用多種核酸工具酶、納米顆粒以及核酸探針技術(shù)等現(xiàn)有的分子生物學(xué)技術(shù)和手段，主要以核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子和汞離子為研究對(duì)象，構(gòu)建了多種新的熒光信號(hào)放大檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)核酸、蛋白質(zhì)和汞離子的定量分析。主要內(nèi)容包括：1、基于核酸適體保護(hù)和核酸外切酶循環(huán)放大構(gòu)建免標(biāo)記熒光檢測(cè)方法檢測(cè)凝血

3、酶本章我們基于核酸外切酶Ⅲ輔助循環(huán)放大策略，核酸適體保護(hù)機(jī)制和鋅原卟啉G四倍體超分子熒光標(biāo)簽構(gòu)建了一種簡(jiǎn)單的、高靈敏的均相檢測(cè)蛋白質(zhì)的新方法。首先，這一創(chuàng)新性的檢測(cè)平臺(tái)設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單，通過(guò)簡(jiǎn)單的混合及孵育即可實(shí)現(xiàn)，避免了繁瑣的操作過(guò)程。通過(guò)利用核酸外切酶不但避免了洗滌及離心的過(guò)程，而且節(jié)省了時(shí)間。其次，適體探針不需要任何修飾和特殊標(biāo)簽，這不但降低了實(shí)驗(yàn)成本及設(shè)計(jì)的復(fù)雜性，而且保持了其與目標(biāo)物結(jié)合的活性。此外，它對(duì)人凝血酶的檢測(cè)限可達(dá)0.2pM

4、，并且通過(guò)改變對(duì)應(yīng)的適體，該方法亦可廣泛應(yīng)用于其他類型生物分子的檢測(cè)。因此，它在生物或臨床目標(biāo)物檢測(cè)中具有很重要的應(yīng)用價(jià)值。2、磁性納米顆粒結(jié)合核酸外切酶輔助循環(huán)放大技術(shù)構(gòu)建免標(biāo)記熒光檢測(cè)新方法定量檢測(cè)DNA本章我們結(jié)合磁性納米顆粒(MNPs)和核酸外切酶III(ExoIII)輔助循環(huán)放大技術(shù)構(gòu)建了一種能檢測(cè)超低濃度目標(biāo)DNA的新方法。我們巧妙設(shè)計(jì)的抓捕發(fā)卡探針(CHP)集多功能設(shè)計(jì)于一體，當(dāng)目標(biāo)DNA存在時(shí)，組裝到磁性納米顆粒上的抓捕