兩種豬源鏈球菌纖連蛋白體外結合的特征.pdf

1、　　豬鏈球菌是集約化養(yǎng)豬場的重要的病原之一。迄今為止，發(fā)現有35個血清型。豬鏈球菌2型(SS2)被認為是毒力最強的。馬鏈球菌獸疫亞種(SEZ)可感染豬、馬、犬、羊、雞、貓及奶牛，在獸醫(yī)方面具有重要的意義。上述兩種菌均是人獸共患病病原，也是我國豬鏈球菌病的主要病原?！　〖毦砻娴氖杷允羌毦匾睦砘匦裕c細菌表面組成物質有很大關系，一定程度上與細菌的致病性有關?！　±w連蛋白(fibronectin，Fn)是由α和β鏈組成的一種二聚

2、體糖蛋白，相對分子質量(Mr)約450kD，由多種類型的細胞表達產生，在動物體內兩種存在方式，一種游離存在于血漿中，一種以纖維狀存在于細胞外基質(ECM)；α與β鏈中均含有Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型三種重復序列；整合素、肝素、膠原/明膠和血纖蛋白都與Fn結合，位置各不相同。細菌表面的Fn結合蛋白在Fn上有不同的結合位置。　　業(yè)已證明化膿性鏈球菌黏附宿主細胞的機制之一是結合Fn，進而定植和侵襲宿主。細菌表面的Fn結合蛋白與ECM的Fn的結合促進上

3、皮細胞內化鏈球菌。細菌與體液中的游離Fn結合在細菌逃避宿主的免疫防御方面也有重要意義?！　〔捎名}析法測定SEZATCC35246株(簡稱ATCC35246)和SS2江蘇分離株HA9801(簡稱HA9801)的表面疏水性，結果表明二菌均為表面疏水菌；ATCC35246既可結合固定的Fn，又結合游離的Fn；而HA9801僅與游離的Fn結合。　　測定OD415結果表明，細菌的吸附隨細菌濃度增加而增加，在108CFU/ml達飽和；包被Fn濃

4、度在0.0625μg/ml～10μg/ml范圍內，對細菌的吸附的影響不顯著；細菌吸附的最佳pH值為7.4?！　「鶕寻l(fā)表的SS2fbps序列，設計并合成一對引物，以HA9801的基因組為模板，采用聚合酶鏈反應(PCR)方法擴增fbps，克隆于pMD-T18載體。測定陽性質粒插入片段的序列。利用DNAstar軟件，比較所測序列與不同來源的SS2的fbps及FBPS與鏈球菌屬其他種同源蛋白的同源性?！　∮门潴w印跡結合試驗表明，表達的融合