11829.集胞藻pcc6803中反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白slr1909對酸耐受的調(diào)控機制的研究

1、集胞藻集胞藻PCC6803中反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白中反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白Slr1909對酸耐受的調(diào)控機對酸耐受的調(diào)控機制的研究的研究RegulationofacidtolerancebyaresponseregulatSlr1909inSynechocystissp.PCC6803學(xué)科專業(yè)：制藥工程研究生：任薔指導(dǎo)教師：張衛(wèi)文教授天津大學(xué)化工學(xué)院學(xué)院二零一四年六月摘要藍細菌在碳循環(huán)中起重要作用，而低pH是藍細菌常見的環(huán)境脅迫之一。目前，盡管已有少數(shù)文獻報

2、道藍細菌對酸性脅迫的分子機制，但是與酸脅迫相關(guān)的調(diào)節(jié)機制還遠未完全闡述。本研究用同源雙交換技術(shù)構(gòu)建了44株缺失反應(yīng)調(diào)節(jié)因子的基因缺失突變株，通過篩選各突變株在酸脅迫下的生長狀況，發(fā)現(xiàn)△slr1909在pH6.16.5條件下，與野生株相比生長速率變慢。綜合使用iTRAQ聯(lián)合LCMSMS蛋白組學(xué)方法、GCMS代謝組學(xué)方法和實時熒光定量PCR方法，我們初步構(gòu)建了反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白Slr1909的酸性應(yīng)答調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。結(jié)果顯示，由Slr1909調(diào)控的信號

3、轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑與之前報道的SphSSphR調(diào)節(jié)途徑可能是相互獨立的，因為酸脅迫下，SphSSphR調(diào)節(jié)途徑中差異表達的蛋白在突變株?slr1909中并未出現(xiàn)差異表達現(xiàn)象。蛋白組學(xué)分析表明，經(jīng)過酸處理的突變株與野生株相比，有24個表達量上調(diào)的蛋白和10個表達量下調(diào)的蛋白。值得指出的是，三個蛋白質(zhì)，Slr1259，Slr1260和Slr1261其編碼基因似乎位于一個操縱子上，在slr1909基因被敲除后，表達量均下調(diào)，說明這些蛋白在酸性環(huán)境下行使