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1、白細(xì)胞介素18(Interleukine-18,IL-18)是1995年由Okmura等發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞因子,具有強(qiáng)烈的IFN-γ誘生能力,在機(jī)體免疫調(diào)控中具有重要作用.雞IL-18(Chicken IL-18,ChIL-18)則是Schneider等2000年發(fā)現(xiàn)的.醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究證明IL-18在抗微生物感染、抗腫瘤免疫中具有應(yīng)用潛力.對于ChIL-18的研究尚處于起步階段,該實(shí)驗(yàn)室在前期的研究中克隆到了chIL-18成熟蛋白基因,該研
2、究中,將此基因亞克隆至原核表達(dá)載體pPROEX<'TM>HT中,構(gòu)建重組質(zhì)粒并進(jìn)行確證性序列測定.然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α并用IPTG于37℃誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得表達(dá),表達(dá)形式為包涵體.凝膠薄層灰度掃描顯示表達(dá)的融合蛋白約占菌體蛋白的30%.SDS-PAGE和Western blot分析顯示,表達(dá)的雞IL-18融合蛋白分子量約為23kDa.包涵體通過6M鹽酸胍裂解后,利用鎳離子親和樹脂進(jìn)行純化.用所獲得的重組ChIl-18融合蛋白及其
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