21261.對羥基苯丙酮酸雙加氧酶的生物模擬研究

1、碩士學位論文對黼丙酮酸雙加氧酶的生物模擬研究Biomimeticstudyof4一HydroxyphenylpyruVateDioxygenase作者學科、學指導完成姓名：專業(yè)：[丁可：教師：登墓妲副麴援日期：20150501大連理工大學DalianUniversityofTechnology大連理工大學碩士學位論文摘要仿生天然酶對底物的特異性識別和作用越來越成為生物醫(yī)藥領域研發(fā)廉價、高效、低副作用新型靶向藥物的一大法寶。因此，通過人工

2、設計生物酶的結構和功能模型來探究天然酶的活性位點和作用機制成為近年來生物無機化學領域的研究熱點。為在分子水平上模擬不同活性中心和底物的取代基效應對于對羥基苯丙酮酸雙加氧酶(4hydroxyphenylpyruvatedioxygenase簡稱HPPD)的影響，本文主要做了以下工作：(1)設計、合成和表征了一個新的的模型配體2(苯基甲基吡啶2甲基)氨甲基苯甲酸L19H(2(phenylmethyl)pyridin2ylmethyl)ami

3、no)methyl)benzoicacid)，其所含的2N1COOH配位位點是天然HPPD的傳統(tǒng)活性中心。(2)合成了5種對位取代瓜：OH、Me、H、Br、N02)的苯丙酮酸作為HPPD底物，其中除對羥基苯丙酮酸得到了烯醇和酮式兩種異構體，其他取代基底物都只得到了烯醇式的異構體。(3)將實驗室己經合成的含2N1COOH(2HislGIul，3N(3His)，3N1COOH(3HislGlu)配位中心的模型配體分別與底物和醋酸亞鐵按1：1

4、：1的比例合成三元亞鐵模型配合物，作為HPPD的結構和功能模型，使用質譜，紅外，電子順磁共振等儀器對其表征，用電化學，高效液相色譜質譜聯(lián)用技術對模型配合物與分子氧的室溫反應進行了定性和定量分析，產物分析結果如下：①5種對位取代(R：OH、Me、H、Br、N02)的苯丙酮酸的烯醇式在含2HislGlu、3His、3HislGlu活性中心的模型配合物中與分子氧反應產物大部分是對位取代苯甲醛DKel型產物(DKel：∥二酮雙加氧酶)。②含3H

5、islGlu和2HislGlu的活性中心的模型配合物中對羥基苯丙酮酸能與分子氧反應得到尿黑酸、對羥基苯乙酸(HPPD型產物)和對羥基苯甲醛(DKel型產物)；含3His活性中心的模型配合物中對羥基苯丙酮酸與分子氧反應得到對羥基苯甲醛(DKel型產物)，表明Glu羧基在HPPD反應中起關鍵作用。③除對羥基苯丙酮酸底物外，其他取代基限：Me、H、Br、N02)的苯丙酮酸底物與分子氧反應未得到HPPD型產物，表明底物對位的羥基在HPPD的反應