22889.金屬離子對蛋白剪接的抑制作用及xafs方法研究cu(his)2水溶液的配位方式_第1頁
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1、中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)碩士學(xué)位論文金屬離子對蛋白剪接的抑制作用及XAFS方法研究Cu(His)2水溶液的配位方式姓名：潘妍申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：無機(jī)生物化學(xué)指導(dǎo)教師：劉揚(yáng)中20110523AbstractIIABSTRACTInthisdissertationwestudyseveralaspectsaboutproteinsplicinginMycobacteriumtuberculosisRecAintein.Firstofallwem

2、adeabriefreviewaboutproteinsplicingtheinternalprotein(intein).Itincludesthedefinitionofproteinsplicingthemechanismofproteinsplicingthecriticalaminoacidsinproteinsplingthenomenclatureofinteininteins’distributiontheclassif

3、icationofinteinstheconservedaminoacidsmotifsininteintheapplicationofinteins.Wescreenseveralproteinsplicinginhibitsusingbothinvivoinvitroscreeningreptersystem.TheinvivoreptersystemareTSreptersystemALSIIreptersystemtheinvi

4、troreptersystemisGFPRecAinteinreptersystem.TheresultsfcomplexP0810isthattheIC50invitrois2.5μMwhiletheinhibitionofinteinsplicingusingTSreptersystemhastheIC50of7.71μMinALSIIreptersystemtheIC50is18.47μM.Ftheinvitrosystemweu

5、sedGSHtoconsumecomplexP0810theinhibitioncanbeattenuated.Soweconcludedthattheinhibitionofsplicingisreversible.Indertogetabetterunderstingofmetalproteininteractionweplannedtodoxraydiffraction.Sosinglecrystalsofmetalprotein

6、areneeded.Threeproteinswereexpressedpurifiedusingmetalchromatographycolumnfollowedbysizeexclusivechromatography.ThebufferpHsalts’concentrationprecipitants’concentrationareoptimizedtoacquiresinglecrystals.Atpresenttheopti

7、mizationprocessisstillgoingon.InaprevioisstudytookinourlabwediscoveredthattheHis73ininteinmightcodinatewithcopperionsplayaroleininhibitingtheproteinsplicing.SowestudiedthecodinationmodeofCu(His)2solutionusingXAFSmethod.A

8、furthersignificanceofthisstudyisthatCu(His)2playsanimptantroleincopperionsbalanceinhumanbloodbyexchangingcopperionswithalbumin.FromourXAFSresultswecanconcludethecodinationmodeunderpH2.84.57.49.8.KeyWds:Proteinsplicingint

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