EGFR單抗偶聯(lián)微管蛋白抑制劑對(duì)人肺癌抑制作用的體外研究.pdf

1、目的：
　　本實(shí)驗(yàn)擬從體外研究 EGFR單抗偶聯(lián)微管蛋白抑制劑（簡(jiǎn)稱抗體藥物偶聯(lián)物、ADC）對(duì)人肺癌A549細(xì)胞的抑制作用及作用的細(xì)胞周期。
　　方法：
　　1、細(xì)胞抑制率：運(yùn)用CCK-8法檢測(cè)EGFR單抗偶聯(lián)微管蛋白抑制劑(ADC)、西妥昔單抗、順鉑在不同濃度不同時(shí)間對(duì)人肺癌A549細(xì)胞的體外抑制作用。
　　2、細(xì)胞周期檢測(cè)：A549細(xì)胞在EGFR單抗偶聯(lián)微管蛋白抑制劑（ADC）、西妥昔單抗、順鉑不同濃度藥物作

2、用24小時(shí)后，使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期。
　　結(jié)果：
　　1、細(xì)胞抑制率結(jié)果：ADC組在低、中、高濃度對(duì)A549細(xì)胞均有明顯抑制作用，西妥昔單抗組對(duì) A549細(xì)胞有一定抑制作用。ADC與西妥昔單抗均為不同濃度時(shí)24小時(shí)細(xì)胞抑制率隨著濃度增加而增加，P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。48小時(shí)低、中濃度抑制率隨著濃度增加而增加，P＜0.05。到高濃度時(shí)不隨時(shí)間和劑量的增加而增加，P>0.05，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。ADC與西妥昔單抗兩藥摩爾

3、劑量接近時(shí)，兩組在24、48小時(shí)比較，均為P＜0.01，有顯著差異。順鉑組低、中、高濃度對(duì)A549細(xì)胞均有明顯抑制作用。低、中濃度時(shí)隨著濃度和時(shí)間增加而增加，P＜0.05；中濃度與高濃度相同時(shí)間比，隨著濃度增加，P>0.05。高濃度時(shí)隨著時(shí)間延長(zhǎng)抑制率無明顯增加，P>0.05。當(dāng)ADC摩爾劑量約為順鉑的0.01時(shí)，24h抑制率 P>0.05，無差異；48h抑制率P＜0.05,ADC作用較順鉑強(qiáng)。提示ADC，西妥昔單抗，順鉑與對(duì)照組比較對(duì)

4、A549細(xì)胞均有抑制作用。在一定劑量范圍內(nèi)ADC與西妥昔單抗、順鉑對(duì)A549細(xì)胞抑制率均隨著濃度和時(shí)間的增加而增加， ADC作用明顯強(qiáng)于西妥昔單抗。在相同摩爾濃度下ADC作用明顯強(qiáng)于順鉑。2、細(xì)胞周期結(jié)果：ADC在不同濃度組與對(duì)照組比較，G2/M期細(xì)胞均明顯增多， G1和S期細(xì)胞均較對(duì)照組減少，P＜0.01，有顯著差異，提示ADC為G2/M期阻滯。西妥昔單抗不同濃度以G1期細(xì)胞為主，G1、S、G2期與對(duì)照組比較均無明顯差異P>0.05。

5、順鉑組不同濃度細(xì)胞各期與對(duì)照組比較，G1期細(xì)胞明顯增多， S、G2期細(xì)胞減少，P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示為G1期阻滯。相同藥物不同濃度之間各期細(xì)胞比較P>0.05，提示細(xì)胞周期的阻滯時(shí)期與藥物濃度無關(guān)。ADC與西妥昔單抗（兩藥分子量接近）相同摩爾濃度0.0134mmol/L各期比較，P＜0.01，提示 ADC與西妥昔單抗阻滯周期不同。ADC0.0134mmol/L與順鉑1.33 mmol/L（ADC摩爾數(shù)約為順鉑的0.01）各期比