23841.雙水相溶劑體系的正交軸逆流色譜及其應(yīng)用研究

1、碩士學(xué)位論文題目雙水相溶劑體系的正交軸逆流色譜及其應(yīng)用研究雙水相溶劑體系的正交軸逆流色譜及其應(yīng)用研究英文題目Sudyapplicationofthecrossaxiscountercurrentchromatographyofaqueousaqueousphasesystems姓名袁海華學(xué)號11108059所在學(xué)院理學(xué)院導(dǎo)師姓名劉楊教授專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)入學(xué)日期2011年9月答辯日期2014年6月汕頭大學(xué)碩士學(xué)位論文I摘要摘要正交

2、軸逆流色譜（XaxisCPC）是高速逆流色譜（HSCCC）的一種，是一種流動相和固定相都為液相的色譜技術(shù)。其原理是依據(jù)物質(zhì)分配系數(shù)不同而實(shí)現(xiàn)分離，具有分離環(huán)境溫和、產(chǎn)品回收率大、純度高、操作簡單等優(yōu)點(diǎn)，非常適合于生物大分子的分離。正交軸逆流色譜儀（XaxisCPC）與普通的高速逆流色譜儀最大的不同就是其自轉(zhuǎn)軸和公轉(zhuǎn)軸相互垂直，其運(yùn)動方式能形成三維的不對稱離心力場，使運(yùn)動螺旋管內(nèi)兩相的流體動力狀態(tài)表現(xiàn)為特殊的形式，非常有利于親水性的較高粘

3、度溶劑系統(tǒng)固定相保留，適用于生物大分子樣品的分離制備。本論文以雙水相體系為為研究對象，以模型蛋白和藻藍(lán)蛋白為目標(biāo)分離蛋白，探索雙水相正交軸逆流色譜分離蛋白的可行性。具體研究內(nèi)容包括以下幾部分：第一部分正交軸逆流色譜儀設(shè)計方案研究。通過查閱相關(guān)資料文獻(xiàn)，設(shè)計六分離柱的正交型逆流色譜儀，包括分離柱尺寸大小，流通管內(nèi)徑及纏繞層數(shù)，以及逆流色譜儀重要參數(shù)如分離柱橫向位移δ值、自轉(zhuǎn)半徑公轉(zhuǎn)半徑比值β值等。最后將設(shè)計稿交由制造方進(jìn)行制造。第二部分可

4、用于正交軸逆流色譜分離的聚乙二醇（PEG）鹽雙水相體系的物化性質(zhì)及分相行為的研究。研究了兩類雙水相體系，PEG有機(jī)鹽（檸檬酸鈉），PEG無機(jī)鹽（硫酸銨）其中PEG的分子量包括1000、2000、4000、6000，系線長度包括30、35、40、45、50。結(jié)果顯示，雙水相體系的密度隨著系線長度的增加而增大；粘度隨PEG分子量增加而增大，并且體系上相的粘度隨著系線長度的增加而增大；體系的界面張力隨著系線長度的增加而增大。同時以PEG檸檬酸

5、鈉和PEG硫酸銨雙水相體系為例，通過測定其相圖中不同區(qū)域成相點(diǎn)的分相速率及相行為變化。鑒定出相圖中上相連續(xù)與下相連續(xù)的區(qū)域，并且發(fā)現(xiàn)了上相連續(xù)區(qū)域和下相連續(xù)區(qū)域之間的相反轉(zhuǎn)臨界區(qū)域。測定出兩個相連續(xù)區(qū)域中雙水相體系的分相時間，并將PEG檸檬酸鈉和PEG硫酸銨雙水相體系的物化性質(zhì)同體系的分相速率進(jìn)行回歸分析，擬合出其兩相相比為1的經(jīng)驗(yàn)方程。計算出的相關(guān)系數(shù)的平方分別為0.960，0.971。第三部分雙水相正交軸逆流色譜實(shí)驗(yàn)。本課題研究了不