除蟲菊素生物合成研究.pdf

1、天然除蟲菊素是一種優(yōu)秀的的植物源殺蟲劑,在如今人們?nèi)找嬷匾暛h(huán)保和自身健康的時代背景下,它對人畜安全、低毒、低殘留的優(yōu)點更顯得突出.該研究以西北農(nóng)林科技大學(xué)提供的除蟲菊(pyrethrum cinerariifolium Trev.)愈傷組織為供試材料,建立生長除蟲菊懸浮系,優(yōu)化生長培養(yǎng)基.在活性追蹤指導(dǎo)下,對除蟲菊細(xì)胞培養(yǎng)物中活性物質(zhì)生物合成進(jìn)行研究,以為今后通過植物細(xì)胞培養(yǎng)途徑產(chǎn)生除蟲菊素提供實驗室小試的理論依據(jù),提高通過植物細(xì)胞培養(yǎng)

2、途徑產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)除蟲菊素的經(jīng)濟(jì)和技術(shù)可行性.具體結(jié)果如下:1.建立了生長良好的除蟲菊細(xì)胞懸浮體系,除蟲菊懸浮細(xì)胞在激素濃度0.5mg/L2,4-D+0.5mg/L 6-BA下生長最好.對懸浮培養(yǎng)基成分中的碳源、氮源、磷源濃度配比進(jìn)行優(yōu)化,蔗糖、氮、磷濃度為40.60g/L、85.95 mmol/L和0.78mmol/L時除蟲菊細(xì)胞生長最好,50ml培養(yǎng)基培養(yǎng)除蟲菊細(xì)胞,鮮重可達(dá)10.5g,為未優(yōu)化時的193%.以篩選得到的培養(yǎng)基培養(yǎng)除蟲菊

3、懸浮細(xì)胞,測定培養(yǎng)過程中的糖利用情況及細(xì)胞活力、pH、和鮮重變化情況.2.選擇甲瓦龍酸生物合成途徑的前體或者有一定調(diào)節(jié)作用的誘導(dǎo)物在除蟲菊細(xì)胞培養(yǎng)第10天添加入培養(yǎng)基中,其中肉桂酸(50mg/L)、水楊酸(10mg/L)、AgNO<,3>(1mg/L)、丙酮酸(200mg/L)對除蟲菊素的生物合成有一定的促進(jìn)作用.3.除蟲菊細(xì)胞培養(yǎng)物的提取分離、生物活性測定做了初步探索.對培養(yǎng)物進(jìn)行氣相色譜檢測,確定培養(yǎng)物中含有除蟲菊素,其中茉莉酸菊酯