28879.植酸酶基因分離及其與木霉系統(tǒng)發(fā)育的關(guān)系

1、山東理工大學(xué)山東理工大學(xué)碩士學(xué)位論文植酸酶基因分離及其與木霉系統(tǒng)發(fā)育的關(guān)系植酸酶基因分離及其與木霉系統(tǒng)發(fā)育的關(guān)系PhytasePhytasePhytasePhytaseGGGGeneeneeneeneIsolationIsolationIsolationIsolationItsItsItsItsRelationshipRelationshipRelationshipRelationshipwithwithwithwithTrichode

2、rmaTrichodermaTrichodermaTrichodermaPhylogenPhylogenPhylogenPhylogenyyyy研究生：羅俊彩羅俊彩羅俊彩羅俊彩指導(dǎo)教師：楊合同楊合同楊合同楊合同協(xié)助指導(dǎo)教師：扈進(jìn)冬扈進(jìn)冬扈進(jìn)冬扈進(jìn)冬申請(qǐng)學(xué)位門類級(jí)別：理理理理學(xué)學(xué)學(xué)學(xué)碩碩碩碩士士士士學(xué)科專業(yè)名稱：生物化學(xué)與分子生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向：微生物分子生物學(xué)微生物分子生物學(xué)微生物

3、分子生物學(xué)微生物分子生物學(xué)論文完成日期：2010201020102010年年年年4444月月月月29292929日日日日分類號(hào)：Q939.95Q939.95Q939.95Q939.95密級(jí)：?jiǎn)挝淮a：10433104331043310433學(xué)號(hào)：Y0710166Y0710166Y0710166Y0710166山東理工大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要I摘要木霉是一類常見的生防真菌，具有重要的科研價(jià)值和廣闊的應(yīng)用前景。對(duì)木霉進(jìn)行準(zhǔn)確的分類鑒定具有重要的

4、意義。本研究主要做了以下工作：1.對(duì)148個(gè)木霉菌株在平板上進(jìn)行了植酸酶酶活測(cè)定，發(fā)現(xiàn)所有菌株都產(chǎn)生了水解圈，這些菌株包括實(shí)驗(yàn)室保存的14株、從中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏中心購(gòu)買的5株、從山東5地區(qū)土壤樣品中分離的87株和從新疆地區(qū)土樣中分離的42株共16個(gè)種類，涵蓋了我國(guó)已發(fā)現(xiàn)木霉的主要種類，說明產(chǎn)植酸酶是木霉菌的普遍屬性。2.選取48個(gè)不同的菌株進(jìn)行了木霉植酸酶基因序列PCR擴(kuò)增，結(jié)果從其中的15個(gè)菌株中獲得了植酸酶基因序列片段，其中不

5、同菌株的四個(gè)植酸酶基因片段已經(jīng)在GenBank注冊(cè)（注冊(cè)號(hào)為：GQ325590，F(xiàn)J501953，F(xiàn)J515694，F(xiàn)J515695）。這15個(gè)序列片段具有不同程度的差異，具有多樣性的特點(diǎn)，另外33個(gè)菌株沒有分離到植酸酶基因，這也說明該基因具有一定的多樣性。3對(duì)側(cè)耳木霉（Trichodermapleuroticola）T21植酸酶完整編碼基因進(jìn)行分析。側(cè)耳木霉T21植酸酶基因序列全長(zhǎng)1720bp，包含1443bp的植酸酶編碼基因的完整序

6、列和三段內(nèi)含子序列，編碼480個(gè)氨基酸，5’端有一段編碼23個(gè)氨基酸的信號(hào)肽序列，其余的457個(gè)氨基酸殘基為成熟植酸酶的氨基酸序列。4對(duì)分離的15個(gè)植酸酶基因序列及對(duì)應(yīng)菌株的ITS序列，利用分子生物學(xué)分析軟件DNAMAN采用最大似然法構(gòu)建進(jìn)化樹，并且分別得出這15個(gè)菌株的這2段不同序列的距離矩陣。比較這2個(gè)距離矩陣和系統(tǒng)發(fā)育樹發(fā)現(xiàn)，對(duì)于親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的遠(yuǎn)緣種，比如屬于不同組的木霉，用ITS序列進(jìn)行鑒定可以得到更好的結(jié)果。對(duì)于一些親緣關(guān)系較