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文檔簡介
1、南京林業(yè)大學碩士學位論文里氏木霉纖維素酶的分離純化與酶學性質研究姓名:于兆海申請學位級別:碩士專業(yè):生物化工指導教師:江華20060601Pu尚cationandCharacterizationofCeHulasesfromtheFungusTdchodermareeseiYuZhaohaiSupervisedbyProfessorJiangHua(ConegeofChemicalEngineering,NanjingForestryU
2、niversity210037)June2006AbstractUsingultrafiltration,cationic(CMSepharoseFDandanionic(DEAESepharoscFF)chromatographyandsizeexclusion(SephadexG100),sixcdlulolyticenzymeswerepurifiedfromtheculturebrothofTrichodermareesei:t
3、hreeendoglucanases(EGIEGII,EGffl),twoceUobiohydrolases(CBHI,CBH]I)anda肛gulcosidase(GB)ThesixceHulasesdisplayedonesinglebandonSDSPAGErespectivelyThespecificactivityofEGI正GIIandEGmwitheathoxyinethylceHulosewasestimatedtobe
4、17635IUmg“115396IUmg16422IUmg“1respectivelyForCBHIandCBHII血cspecificactivitywas1686IUmgq482IUmg1respectivelywithmierocelluloseThespecificactivityofthe13gulcosidasewitllsalicinwas31_00IUna91Basicenzymaticcharacteristicofo
5、btainedcellulaseswerestudiedTherelativemolecularweightofEGI,EGII。EGⅢ,CBHI,CBHⅡandGBwas50kD,46kD,25kD,65kD,581kDand75kD,respectivelyKineticsmethodshowedtheKmofEGI,EGII,EGIIIforcarboxymethylcellulosewas670meCmL,846mg/mL,13
6、22mgCmLrespectivelyForCBHIandCBHII,theKmWithmicroceUulosewas137mg/mL’and346mg/mLrespectivelyTheKmofB—gulcosidasewithsalicinwas220mg/mLForEGI,EGII,EGIII,CBHI,CBHⅡandGB,theoptimumtemperturewas55“C,50(2,55“C,60。C,45(2and60。
7、CrespectivelywhiletheiroptimumpHat56,44,50,56,50and50Besides,theeeUulaseshadtherelativelygoodstabilityunder30。C,whileinthetempertureupon80℃theylosttheiractivityquicklyTheceHulaseswererelativelystablewithinpH5ON62EGI和CBHI
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