2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、以纖維素、半纖維素和木質素形式存在的生物質原料數(shù)量豐富,發(fā)展和利用生物質能源是實現(xiàn)經(jīng)濟、社會可持續(xù)發(fā)展的有效途徑。在生物質原料轉化利用方面,里氏木霉(Trichoderma reesei)是產(chǎn)纖維素酶的重要菌種之一,其生產(chǎn)的纖維素酶在能源、生物防治、食品等多個領域都得到了廣泛的應用。本研究通過對里氏木霉進行紫外誘變,以篩選出高產(chǎn)纖維素酶的突變菌株,進一步提高其纖維素酶的產(chǎn)量,降低生產(chǎn)成本為目的。
   本文基于篩選高產(chǎn)纖維素酶突

2、變菌株的目的,對里氏木霉Rut C30進行紫外誘變,篩選突變菌株,并對其突變菌株的產(chǎn)酶條件進行優(yōu)化,通過隨機擴增多態(tài)性DNA(RAPD)對出發(fā)菌株和突變菌株的基因組進行分析。
   對T.reesei Rut C30的孢子懸液進行紫外線誘變,確定最佳誘變時間為40s,該劑量下致死率為83.500%,正突變率為8.679%,以剛果紅篩選培養(yǎng)基上水解圈與菌落直徑的比值(H/d)為指標,進行初篩,再以液體發(fā)酵產(chǎn)酶進行復篩,最終獲得了一

3、株突變株A13,其濾紙酶活為4.328U/ml,相較于出發(fā)菌株2.786U/ml的酶活,提高了55.350%。對突變株A13進行6代連續(xù)培養(yǎng),酶活穩(wěn)定在4.160U/ml,其遺傳穩(wěn)定性較好。
   通過碳源、復合氮源、產(chǎn)酶溫度這三個單因素優(yōu)化實驗,獲得了突變菌株A13產(chǎn)酶的最佳條件,以1.000%微晶纖維素為碳源、0.150%蛋白胨與0.050%硫酸銨為復合氮源,產(chǎn)酶溫度為28℃的條件下,突變菌株A13的濾紙酶活為4.915U/

4、ml,比優(yōu)化前的4.160U/ml提高了18.150%。
   在含有微晶纖維素的產(chǎn)酶培養(yǎng)基中添加適量的麥芽浸粉,實驗表明,麥芽浸粉確實能促進里氏木霉的突變株產(chǎn)出更多的纖維素酶。當在1.000%微晶纖維素的基礎上添加1.000%麥芽浸粉時,濾紙酶活提高到了5.720U/ml。采用中心復合實驗設計,尋找微晶纖維素與麥芽浸粉的最佳配比。對中心復合實驗設計的實驗結果進行響應面分析,結果表明,在優(yōu)化后的產(chǎn)酶條件下,當微晶纖維素和麥芽浸粉

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