綠色木霉產纖維素酶制備低聚殼聚糖.pdf

1、低聚殼聚糖(chitosan oligosaccharide)是殼聚糖的寡聚物，是由氨基葡萄糖以β-1，4鍵連接2-20個單元的低聚糖，分子量低于10000，可以廣泛地應用于醫(yī)藥、食品、飲料、化妝品等多種工業(yè)領域中，其市場價值遠遠高于其它甲殼素產品。低聚殼聚糖可通過專一性酶和非專-性酶降解殼聚糖而獲得，酶法制備低聚殼聚糖具有反應條件溫和、水解效率高、環(huán)境清潔、產物安全性高等優(yōu)點，而且容易控制產物的聚合度，代表了今后低聚糖合成的方向。而纖

2、維素酶由于可有效降解殼聚糖生成低聚殼聚糖，并且廉價易得，日益成為降解殼聚糖的熱門的水解酶。基于此，本論文對綠色木霉產纖維素酶降解殼聚糖條件進行了優(yōu)化，并對水解產物低聚殼聚糖進行了質量評價和抑菌效果的研究。
　　 采用實驗室保存的綠色木霉產的纖維素酶(殼聚糖酶活為7IU/mL)水解殼聚糖，并對纖維素酶水解殼聚糖的條件進行了研究，以產物中還原糖濃度、水解液的特性粘度和平均聚合度三個方面為指標，得出纖維素酶水解殼聚糖的最佳條件為：作用

3、溫度為50℃；最適作用pH為5.0;確定了最佳酶加入量為6IU/(g底物)；底物濃度為3％等。通過薄層層析法和質譜法對水解液進行分析，以甲殼低聚糖(1-6糖)為標樣，證明了水解液中含有1-7糖，則纖維素酶可有效水解殼聚糖。
　　 通過酶水解-膜分離的耦合機制制備分離低聚殼聚糖，這樣不僅可以分離到分子質量分布窄的水解產物，還可以重復利用水解酶，連續(xù)進行水解，提高水解效率。膜通量與操作壓力和超濾時間有關，操作壓力達到0.40MPa及

4、超濾時間為3.5h時，膜通量保持恒定。水解液透過分子量10000的水解膜，得到平均分子質量為2000的水解產物，水解得率為40.5％。
　　 對低聚殼聚糖(COS)的理化特性和功能性質進行了研究，結果表明：水解產物的平均相對分子質量為1485，脫乙酸度(D.D.)為91.61％，含水量為6.5％，低聚殼聚糖含量為81％，水解產物各方面均達到標準質量指標；水解產物在pH1-13的范圍內都有良好的水溶性，當pH＞8.0時，COS在水

5、中的溶解性略有下降；COS在濃度40％的乙醇溶液中可以完全溶解，此后隨著乙醇濃度的增加產品的溶解性下降；當pH＜9.68時，COS顯示陽離子性質；溫度≤80℃，COS溶液較穩(wěn)定；COS具有良好的吸濕保濕能力，保濕性較強于甘油，而它的原材料殼聚糖的保濕性差；COS易于發(fā)生美拉德褐變反應，應保存于干燥、低溫環(huán)境下。
　　 論文初步討論了水解產物低聚殼聚糖對大腸桿菌和綠色木霉的抑制作用，初步研究了其抑菌活性與濃度的關系。結果表明：低聚