29951.基于聚乙二醇(peg)自組裝膜的蛋白質(zhì)陣列制備及表征

1、法西料技大學(xué)論文題目：基于聚乙二醇(PEG)I芻組裝膜的蛋白質(zhì)陣列制備及表征學(xué)科門類：理學(xué)一級(jí)學(xué)科：化學(xué)培養(yǎng)單位：化學(xué)與化工學(xué)院碩士生：顏莉?qū)煟簞⒂矜?014年5月基于聚7_醇(PEG)自組裝膜的蛋白質(zhì)陣列制備及表征摘要蛋白質(zhì)陣列又稱蛋白質(zhì)芯片，是一種新型的蛋白質(zhì)分析手段，集高通量、平行性、高效性于一體。它可以成為一種快速且高通量的研究蛋白質(zhì)功能、結(jié)構(gòu)、生物分子間相互作用的小型平臺(tái)，被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)分析、藥物篩選、疾病診斷、新藥開

2、發(fā)等領(lǐng)域。盡管備受關(guān)注，但是蛋白質(zhì)陣列的制備技術(shù)依然存在問題，比如，如何使蛋白質(zhì)分子在其固定于陣列表面的過(guò)程中能夠保持更高的生物活性以及探索更簡(jiǎn)便的制備方法。本文采用自組裝技術(shù)制備了一系列在金表面具有不同摩爾比的甲氧基聚乙二醇硫醇與羧基聚乙二醇硫醇混合自組裝膜(SHPEGOCH3／SHPEGCOOH)，并將蛋白質(zhì)分子以共價(jià)鍵結(jié)合的方式固定在膜表面。通過(guò)原子力顯微鏡(AFM)、接觸角測(cè)試儀和XPS技術(shù)對(duì)混合自組裝膜和蛋白質(zhì)表面的粘附力、形

3、貌、親疏水性、元素、鏈排列等進(jìn)行了分析表征。通過(guò)抗原抗體反應(yīng)檢驗(yàn)了蛋白質(zhì)表面生物活性的相對(duì)大小。進(jìn)一步以光刻壓印技術(shù)為基礎(chǔ)，在覆蓋有自組裝膜的陣列襯底上對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行直接共價(jià)固定，研究了一種制備高活性蛋白質(zhì)陣列的新方法。通過(guò)AFM對(duì)蛋白質(zhì)陣列的形貌進(jìn)行了表征，用XPS對(duì)為蛋白質(zhì)陣列的表面元素、接枝量和抗吸附性能進(jìn)行了表征，利用抗原抗體反應(yīng)對(duì)蛋白質(zhì)陣列表面的活性進(jìn)行了檢測(cè)。主要研究結(jié)果如下：白組裝膜表面兩種硫醇溶液的比例組成與溶液中的組成并

4、不完全一致。接枝上的蛋白質(zhì)的形貌及蛋白質(zhì)膜表面粘附力分布與自組裝膜的表面組分有關(guān)。當(dāng)反應(yīng)溶液中SHPEGOCH3／SHPEGCOOH摩爾比為1：6時(shí)，所形成的自組裝膜的表面羧基含量最大，同時(shí)粘附力也達(dá)到最高值。另外，在此合成條件下蛋白質(zhì)的接枝效率最高?？乖贵w活性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明自組裝膜上蛋白質(zhì)的表面形貌和表面粘附力都會(huì)影響其與抗體的反應(yīng)活性。在SHPEGOCH3／SHPEGCOOH摩爾比為l：6條件下制備的自組裝膜上的抗原蛋白質(zhì)表現(xiàn)出