30863.誘導(dǎo)調(diào)控型人工嵌合啟動(dòng)子的功能研究_第1頁
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1、山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文誘導(dǎo)調(diào)控型人工嵌合啟動(dòng)子的功能研究姓名：代立新申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：發(fā)育生物學(xué)指導(dǎo)教師：張慧20090411山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文AP、、ElmlK】Nj七cORj5A七RD29A；APE)LTl30ERDlⅪN1jrCoRl5ARD29A：AP3、ERDjcoRl5AcoRl5ARD29ARD29A；AP4)ERDlKINiCoRl5ARD29ARD29A：AP5、ERDlERDlcoRi5ARD29ARD

2、29A；AP6)ERDlKINl七CoRl5ALll30RD29A：NP)作為對照的肋2姐全長啟動(dòng)子。同AP2比，API的5’端少了LTl30片斷，二者對比觀察LTl30關(guān)鍵片斷有無和活性的關(guān)系。AP2與AP6反映LTl30位置和活性的關(guān)系。AP3、AP4、AP5均含二聚體，體現(xiàn)二聚體的特點(diǎn)，它們第二個(gè)片斷種類的變化是否能引起活性的改變呢整體對比，找出活性最強(qiáng)的啟動(dòng)子組合。我們選用含有多拷貝GUS基因的pCAMBIA3301作為植物表達(dá)

3、載體。分別用上述六條人工構(gòu)建的嵌合誘導(dǎo)調(diào)控型啟動(dòng)子和RD29A全長啟動(dòng)子取代pCAMBIA3301上GUS基因上游的CaMV35S啟動(dòng)子，調(diào)控其下游的GUS基因的表達(dá)。將七個(gè)重組表達(dá)pCAMBIA3301載體分別從大腸桿菌EcoliDH50t導(dǎo)入農(nóng)桿菌GV3101，用花浸染法轉(zhuǎn)化擬南芥，得到七個(gè)轉(zhuǎn)化株系。篩選出子代純合體，PCR鑒定，再用高鹽、干旱、低溫等處理，GUS活性分析鑒定各個(gè)啟動(dòng)子的誘導(dǎo)活性并相互比對，以期望得到能對多種脅迫敏感

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