大麥根尖和邊緣細胞鋁毒生物學特性及其機理研究.pdf

1、浙江大學博士學位論文大麥根尖和邊緣細胞鋁毒生物學特性及其機理研究姓名：潘建偉申請學位級別：博士專業(yè)：遺傳學指導教師：朱睦元2002.5.1不可逆的過程。通過基因工程方法導入凋亡抑制基因是作物抗逆性遺傳改良的一條新策略，也是細胞凋亡研究成果的具體應用，目前國內仍未見正式報道。本研究試圖通過農(nóng)桿菌介導法將凋亡抑制基因ced09導入煙草，獲得高耐鋁性的轉基因植株。結果表明，利用pGEM一7z“)載體上的SacI和XbaI位點，將pBS載體上的

2、ced9基因成功地克隆到表達載體pBIl21(含CaMV35S)上，定名為pBIted一9。通過農(nóng)桿菌感染煙草葉盤，經(jīng)篩選、誘導和分化后，共獲得96株再生植株(To)。經(jīng)PCR檢測和Southern雜交表明，目的基因ced9已整合到煙草基因組中。有關轉基因植株的ced9表達活性及其對生長發(fā)育的影響、耐鋁性鑒定將在Tl、T2、T3代進行。根邊緣細胞(BC)研究是最近幾年植物學和遺傳學的新領域之一。本實驗表明，大麥CVHang981BC發(fā)育

3、啟動與根發(fā)育幾乎同步，這與豆科植物BC發(fā)育不同。在懸空氣培中，大麥BC發(fā)育屬于非組成型表達的過程。在水培中，每個根每天仍釋放300350個BC，屬于組成型表達過程。根冠PME活性檢測表明，大麥BC發(fā)育與PME活性具有密切的相關性，PME活性在BC游離過程中起著重要作用。溫度對大麥根伸長有明顯的抑制作用，但對BC發(fā)育影響不大。鋁毒對離體收集的BC活性影響非常明顯。大麥耐鋁品種CVHumai16的BC經(jīng)20和501tmoI／LAI處理后，其

4、活性無顯著性差異，而敏感品種CV20002的BC活性卻受到顯著抑制，說明BC的耐鋁性與其個體植株水平的耐鋁性相一致。到目前為止，國內外有關鋁毒對植物BC發(fā)育的影響仍未見正式報道。本實驗表明，鋁毒對大麥BC發(fā)育有明顯的抑制作用。20“m01／LAI對cv20002的BC發(fā)育有顯著性抑制(PO05)，但對CVHumai16的BC發(fā)育的影響不大。50umol／LAl對這兩個品種的BC發(fā)育均有顯著性抑制(P(Ooi)。PME活性檢測表明，鋁毒很