山羊卵母細(xì)胞孤雌激活和孤雌胚體外發(fā)育的研究.pdf

1、該文對體外成熟山羊卵泡卵母細(xì)胞孤雌激活和孤雌胚體外發(fā)育進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究,主要結(jié)果如下:1、化學(xué)物質(zhì)離子霉素、Ca-A23187和乙醇均能有效激活山羊卵母細(xì)胞.2、在含Ca<'2+>電激液中,分別用1.00kv/cm、1.25 kv/cm、1.50 kv/cm和1.80 kv/cm電壓,脈沖持續(xù)80μs,2次電脈沖刺激卵母細(xì)胞,其激活率分別為48.4％、54.3％、55.8％和45.1％,差異不顯著(P<0.05).3.體外培養(yǎng)18h

2、、21h、24h、27h、30h、33h和36h的成熟卵母細(xì)胞,激活率分別為27.4％、38.4％、42.1％、58.2％、60.0％、64.7％和73.1％,培養(yǎng)36h、33h和30h卵母細(xì)胞激活率極顯著高于18h、21h、24h卵母細(xì)胞激活率(P<0.01),27h卵母細(xì)胞激活率極顯著高于18h和21h卵母細(xì)胞激活率(P<0.01),顯著高于24h卵母細(xì)胞激活率(P<0.05).培養(yǎng)24h和27h組桑椹胚發(fā)育率分別為2.4％和4.2

3、％.4、激活時(shí)隨卵母細(xì)胞周圍卵丘細(xì)胞層數(shù)增多,激活率顯著下降.5、離子霉素、Ca-A23187、乙醇和直流電脈沖分別與6-DMAP或CB使用可以提高其激活效率,但沒有達(dá)到顯著水平(P>0.05).6、單倍體孤雌胚體外培養(yǎng),2~4-細(xì)胞卵裂率、大于4-細(xì)胞發(fā)育能力與二倍體相似(P>0.05),大于8-細(xì)胞的發(fā)育力單倍體顯著低于二倍體(P<0.05),單倍體在體外發(fā)育沒有能夠突破16-細(xì)胞,二倍體桑椹胚體外發(fā)育率為5.7％.孤雌胚體外發(fā)育速