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1、該研究圍繞該候選基因和秈粳不育完成了以下工作:1.對(duì)候選基因進(jìn)行了表達(dá)分析,RT-PCR結(jié)果顯示候選基因在秈粳品種和廣親和品種的花器官中均有表達(dá);2.將對(duì)應(yīng)候選基因3’端的shotgun亞克隆4A9反方向接入35S啟動(dòng)子和nos終止子之間,并構(gòu)建了以pCAMBIA1301為基礎(chǔ)的反義(antisense)轉(zhuǎn)化載體;3.通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將反義構(gòu)建體轉(zhuǎn)化粳稻品種牡丹江8號(hào),共獲得T0代轉(zhuǎn)基因單株153株,報(bào)告基因PCR平均陽(yáng)性率為93﹪;以
2、T0代轉(zhuǎn)基因植株與秈稻珍汕97雜交或T1代株系的混合花粉授予珍汕97,共得到測(cè)交F,<,1>代雜交組合54個(gè),育性考查發(fā)現(xiàn)同一株系內(nèi)轉(zhuǎn)基因單株的平均結(jié)實(shí)率相對(duì)于未轉(zhuǎn)基因單株沒(méi)有顯著提高;RT-PCR檢測(cè)到T0代轉(zhuǎn)基因植株中反義片段的表達(dá).4.抽提明恢63花藥/柱頭cDNA文庫(kù)質(zhì)粒6144個(gè),制成高密度cDNA點(diǎn)陣膜;分別用南京11/秋光(秈粳交)F<,1>代和南京11/02428(秈/廣親和)F<,1>代花藥柱頭混合RNA反轉(zhuǎn)錄成的cD
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