不同日糧模式對泌乳奶牛乳腺乳蛋白合成影響的研究.pdf

1、牛乳中乳蛋白含量較低是中國乳品行業(yè)所面臨的重要問題，立足于中國的飼料資源，通過日糧調(diào)控的途徑提高乳蛋白含量與產(chǎn)量將有現(xiàn)實(shí)意義。本研究比較了中國奶牛養(yǎng)殖模式中三種具有代表性的日糧模式對泌乳奶牛乳腺乳蛋白合成的影響，找出了可能影響乳蛋白合成的關(guān)鍵因素，為提高奶業(yè)生產(chǎn)水平，推動奶業(yè)發(fā)展提供科學(xué)數(shù)據(jù)。
　　試驗(yàn)1不同氨基酸模式對奶牛乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白合成的影響及機(jī)理研究
　　本論文首先在體外研究了不同氨基酸模式對奶牛乳腺上皮細(xì)胞酪蛋

2、白合成的影響，目的是確定氨基酸模式是否會影響乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白的分泌，并對其機(jī)理進(jìn)行初步研究。試驗(yàn)采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，氨基酸模式分別為：低蛋白日糧條件下血液氨基酸組成模式組(LPBP)、全乳蛋白氨基酸組成模式組(MP)、酪蛋白氨基酸組成模式組(CP)、80%酪蛋白+20%乳清蛋白氨基酸組成模式組(CLP)，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，試驗(yàn)重復(fù)3遍（n=12）。用RT-qPCR檢測CSN1S1、CSN3、GLUT1、PRLR、STAT5和mTOR

3、基因表達(dá)量，用Elisa法檢測αS-酪蛋白合成量，用CCK-8檢測細(xì)胞增殖活性。試驗(yàn)結(jié)果顯示：氨基酸模式的不同影響奶牛乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白的合成，全乳蛋白模式可能是一種較為理想的氨基酸模式。氨基酸模式通過調(diào)節(jié)mTOR、STAT5、PRLR和GLUT1基因的表達(dá)影響酪蛋白的合成。此外，研究發(fā)現(xiàn)在體外培養(yǎng)條件下，乳腺上皮細(xì)胞增殖活性與乳蛋白基因表達(dá)的趨勢并不一致。
　　試驗(yàn)2不同日糧模式對泌乳奶牛乳產(chǎn)量與乳成分的影響
　　論文的第

4、二部分通過動物試驗(yàn)明確了不同日糧模式對泌乳奶牛乳產(chǎn)量與乳成分的影響程度，為進(jìn)一步闡述不同日糧模式對乳腺內(nèi)乳蛋白合成的影響提供數(shù)據(jù)。采用完全隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)設(shè)計(jì)，30頭牛分為3組，每組10頭。分別飼喂三種日糧：1）代表規(guī)?；B(yǎng)殖場日糧模式的混合粗飼料組（Mixed forage MF）；2）代表奶牛養(yǎng)殖小區(qū)養(yǎng)殖模式的高精料秸稈組（Corn straw A）；3）代表散戶養(yǎng)殖模式的低精料秸稈組（Corn straw B）。試驗(yàn)期12周，預(yù)飼期3

5、周,正式試驗(yàn)期9周，每3周為一個(gè)試驗(yàn)周期，在每個(gè)試驗(yàn)周期的15～18d采集飼料樣、乳樣，并記錄產(chǎn)奶量。試驗(yàn)結(jié)果顯示：MF組日糧的整體生產(chǎn)水平最佳，CSA組雖然在乳蛋白含量與產(chǎn)量上與 MF組沒有顯著性差異，但是泌乳效率顯著低于MF組，CSB組除乳脂率外，其他乳成分指標(biāo)均低于CSA組與MF組。以上結(jié)果提示：營養(yǎng)水平滿足需要時(shí)，平衡日糧的營養(yǎng)素利用效率更高；CSB組日糧營養(yǎng)水平滿足不了泌乳需要。
　　試驗(yàn)3不同日糧模式下泌乳奶牛動靜脈血

6、中乳蛋白合成相關(guān)代謝物分析
　　在試驗(yàn)2的基礎(chǔ)上，對泌乳奶牛陰部外動脈與乳靜脈血中乳蛋白合成相關(guān)代謝物含量進(jìn)行分析，以期找出影響乳蛋白合成的關(guān)鍵因素。試驗(yàn)結(jié)果顯示：不同日糧模式對泌乳奶牛陰外動脈血液中 PRL、GH、INR、IGF-1、和葡萄糖的含量沒有顯著影響（P>0.05），CSA組陰外動脈血中血漿尿素氮(BUN)及瘦素含量顯著高于CSB組與MF組（P<0.05），提示高精料秸稈組氮的利用效率較低，瘦素可能影響了CSA組乳脂的

7、合成。CSA組和CSB組乳靜脈靜脈血中谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）含量顯著高于MF組(P<0.05),提示秸稈組日糧可能會影響肝臟的健康。不同日糧模式下泌乳奶牛陰外動脈血漿中大部分氨基酸濃度與比例沒有顯著差異，但是 Asp、Arg、Thr、His、Gly和Leu的比例有顯著差異或有差異顯著的趨勢。
　　試驗(yàn)4不同日糧模式下泌乳奶牛乳腺對氨基酸的攝取與利用
　　在試驗(yàn)2的基礎(chǔ)上，分析了不同日糧模式下乳腺對氨基酸的攝取與利用的差異。結(jié)果

8、顯示：限制CSB組乳腺對氨基酸利用的因素是陰外動脈血所提供EAA的絕對量少，其原因是CSB組日糧營養(yǎng)水平低，血流量小，所提供營養(yǎng)物質(zhì)的絕對量不能完全滿足乳腺泌乳的需要。CSA組與MF組乳腺對氨基酸的吸收與利用方面沒有顯著的差別。
　　試驗(yàn)5不同日糧模式下泌乳奶牛乳腺組織中泌乳相關(guān)基因表達(dá)
　　在試驗(yàn)2的基礎(chǔ)上，采集了不同日糧模式下泌乳奶牛的乳腺組織用于 RNA提取，并用RT-qPCR檢測CSN1S1、CSN1S2、CSN3、

9、INSR、PRLR、GHR、JAK2、STAT5和mTOR基因表達(dá)量。研究結(jié)果顯示：日糧模式的不同能夠影響泌乳奶牛乳腺組織內(nèi)乳蛋白基因的表達(dá)，日糧營養(yǎng)水平與平衡性會通過影響乳腺組織內(nèi)PRLR、GHR、INSR、及 mTOR基因的表達(dá)，進(jìn)而影響乳蛋白的合成。在營養(yǎng)水平相同的情況下，平衡的日糧更能促進(jìn)乳蛋白基因的表達(dá)。
　　總體試驗(yàn)結(jié)果顯示：氨基酸供給量與在乳腺內(nèi)利用效率的差異是影響不同日糧模式下乳蛋白含量與產(chǎn)量的重要原因，通過檢測乳