荔枝、龍眼離體培養(yǎng)及再生植株的研究.pdf

1、荔枝(Litchi chinensis Sonn.)和龍眼(Dimocarpus longan Lour.)離體培養(yǎng)比較困難,正常體胚誘導(dǎo)率低,再生植株頻率也較低,嚴(yán)重制約了其新品種選育的進程及生物技術(shù)的發(fā)展。本研究選取廣西主栽品種禾荔和石硤龍眼為試材,研究了禾荔的花藥、莖段、葉片、種子等作為外植體經(jīng)過離體培養(yǎng)誘導(dǎo)愈傷組織發(fā)生的過程,通過體細胞胚胎發(fā)生途徑基本建立了禾荔的再生體系;初步探索出了石峽龍眼種子離體培養(yǎng)體胚途徑獲得再生植株的過

2、程;同時以禾荔和石硤龍眼的帶腋芽莖段為外植體,通過器官發(fā)生途徑分別獲得了再生植株,以期為荔枝、龍眼的生物技術(shù)基礎(chǔ)理論研究、遺傳轉(zhuǎn)化、新品種選育等提供理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持。主要的研究結(jié)果如下:
　　1、通過對禾荔荔枝品種的花藥、葉片、莖段、種子等不同外植體進行愈傷組織的誘導(dǎo),獲得了不同類型的愈傷組織,最高誘導(dǎo)率分別為82.1％、86.0%、81.3%、84.0%,篩選出了較適合荔枝花藥產(chǎn)生大多數(shù)是胚性愈傷組織的培養(yǎng)基 MS+0.1g/

3、L VC+2.5mg/L2,4-D+0.5mg/L6-BA+1.0mg/L NAA+2.0mg/L KT+3%蔗糖+0.7%瓊脂。
　　2、花藥的胚性愈傷組織繼代培養(yǎng)基選用MS+1.5mg/L2,4-D+0.5 mg/L6-BA+3%蔗糖+0.7%瓊脂和MS+1.0mg/L2,4-D+1.0 mg/L KT+5.0 mg/L AgNO3+3%蔗糖+0.7%瓊脂交替繼代培養(yǎng)的方法,每21d繼代一次,繼代4-5次,可得到穩(wěn)定的胚性愈傷

4、組織系。
　　3、將禾荔花藥誘導(dǎo)出的胚性愈傷組織進行體胚誘導(dǎo),篩選出較高頻率的體胚誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方:MS+100mg/L肌醇+0.1mg/L NAA+3.0mg/L CPPU+80ml/L椰汁+5%蔗糖+0.9%瓊脂,之后在弱光下繼代2次,體胚即可成熟。
　　4、將成熟體胚轉(zhuǎn)移到植株再生培養(yǎng)基上,篩選出效果較好的再生培養(yǎng)基為:MS+100mg/L肌醇+1.0mg/L IBA+0.1 mg/L6-BA+60ml/L椰汁+3%蔗糖

5、+0.7%瓊脂,目前只得到生根的體胚,體胚生根率為12.5%,完整植株的獲得及煉苗、移栽還待進一步研究。
　　5、以禾荔和石峽龍眼帶腋芽莖段為外植體,直接誘導(dǎo)其莖段萌芽,較好的萌芽培養(yǎng)基分別為MS+0.6mg/L6-BA+0.2mg/L IAA+3g/L AC+3%蔗糖+0.7%瓊脂、MS+0.6mg/L6-BA+0.4mg/L IAA+3g/L AC+3%蔗糖+0.7%瓊脂,萌芽率分別為75.6%、71.7%,之后誘導(dǎo)芽苗生根較