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文檔簡介
1、Agouti基因在畜禽的毛色合成過程中扮演著重要的角色。本文首先采用生物信息學(xué)分析方法,對來自15個物種的71條Agouti基因完整編碼序列(CDS)進行遺傳多樣性分析、雞Agouti基因啟動子預(yù)測;然后,采用PCR擴增產(chǎn)物直接測序的方法,分別對Agouti基因3'UTR(太行雞麻羽、黑羽、白羽,羅曼雞,海蘭褐雞)和外顯子4(太行雞、靈山雞×太行雞)單核苷酸多態(tài)性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)篩
2、查和遺傳多樣性分析,并采用SNPs基因型頻率和單倍型等位基因頻率相結(jié)合的方法,分析Agouti基因SNPs與雞羽色、體尺指標(biāo)、屠宰性能的相關(guān)關(guān)系。其目的就在于探討Agouti基因的種間變異特征,預(yù)測雞Agouti基因啟動子;另一方面篩查雞Agouti基因變異,研究其在不同羽色雞群體中的多態(tài)性以及與生產(chǎn)性能的相關(guān)性,從而為雞Agouti基因遺傳多樣性,太行雞新品種的選育提供參考依據(jù)。
生物信息分析結(jié)果顯示:物種間Agouti
3、基因平均凈遺傳距離(Da)和核苷酸歧化度(Dxy)分別為0.2256和0.2145。Agouti基因在拉布拉多白足鼠(Peromyscus maniculatus)和羊駝(Lama pacos)中具有最大的遺傳多樣性。通過比較平均凈遺傳距離(Da)和核苷酸歧化度(Dxy)可知,哺乳動物與斑馬魚的親緣關(guān)系比鳥類與斑馬魚的更近。雞Agouti基因啟動子預(yù)測的區(qū)域位于起始密碼子上游2600bp-3000bp之間。
雞Agouti
4、基因3'UTR共發(fā)現(xiàn)9個變異位點(g.1554591C>A、g.1554621C>A、g.1554693T>C、g.1554694G>A、g.1554788C>T、g.1554798A>G、g.1554806C>A、g.1554712T>C和g.1554767C>G),其中兩個太行雞個體中新發(fā)現(xiàn)的位點(g.1554712T>C和g.1554767C>G)為稀有突變。太行雞麻羽和白羽個體的多態(tài)位點均處于哈代-溫伯格平衡狀態(tài),但是黑羽個體除
5、了位點g.1554806C>A外g為不平衡狀態(tài)。分析9個變異位點共得到6種單倍型,其中單倍型HAP1(AACATGATC)和HAP2(CCTGCAATC)為兩種主要的單倍型,其他單倍型均是以上兩種單倍型分化而成。分析顯示,有6個變異位點(g.1554591C>A、g.1554621C>A、g.1554693T>C、g.1554694G>A、g.1554788C>T和g.1554798A>G)處于完全連鎖狀態(tài),命名為“位點2”。變異位點基
6、因型頻率比較發(fā)現(xiàn),不同羽色太行雞間無顯著差異(p>0.05);在位點2上,太行雞、羅曼雞和海藍褐雞之間存在顯著性差異(p<0.01);在位點1(g.1554806C>A)上,太行雞黑羽和麻羽個體與羅曼雞、海藍褐雞之間存在顯著性差異(p<0.05)。相關(guān)性分析結(jié)果顯示,位點2與活體重和體尺(體斜長、脛長、骨盆寬、胸角、龍骨長和脛圍)之間存在顯著相關(guān),與屠宰性能(胸肌率和翅膀率)也存在顯著相關(guān)關(guān)系。
太行雞(F0)和雜交一代(
7、F1,靈山雞×太行雞)Agouti基因外顯子4測序分析發(fā)現(xiàn),F(xiàn)0中發(fā)現(xiàn)了10個變異位點,F(xiàn)1中發(fā)現(xiàn)了8個變異位點。在F0中除了位點g.1554779T>G外所有位點均未處于哈代-溫伯格平衡狀態(tài),F(xiàn)1中所有多態(tài)位點處于哈代-溫伯格平衡狀態(tài)。在混合群體中共發(fā)現(xiàn)了兩個連鎖位點(g.1554892G>A和g.1554994T>G)。對7個主要多態(tài)位點分析,共得到了7中單倍型,其中Hap5(TCATGTT)和Hap7(TTGCAGG)為兩種主要單
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