聯(lián)合應(yīng)用IVM和TCBZ在蠕蟲感染綿羊體內(nèi)的動力學(xué)相互作用研究.pdf

1、為了研究伊維菌素和三氯苯達唑藥物相互作用對藥代動力學(xué)的影響，本試驗選取了自然條件下感染消化道蠕蟲的15只鄂爾多斯細毛羊，感染強度為每克糞便蟲卵數(shù)量在1500以上，隨機分成3組，第1組綿羊以0.2 mg·kg-1的劑量皮下注射伊維菌素，第2組綿羊以12 mg·kg-1的劑量單獨灌服三氯苯達唑混懸液，第3組綿羊以與第1組相同劑量、相同給藥方式給藥伊維菌素，同時以與第2組相同劑量、相同給藥方式給藥三氯苯達唑。于給藥后第0.75、2、4、8、1

2、6、24、36、48、72、120、192、336h，頸靜脈采集血樣并分離血漿，置-39℃冰箱保存待測。
　　試驗首先建立了綿羊血漿中伊維菌素（IVM）的高效液相色譜（HPLC）熒光檢測方法，以阿維菌素（AVM）作為內(nèi)標(biāo)物，用甲醇沉淀血漿蛋白，然后經(jīng)C18固相萃取柱凈化，并經(jīng)衍生反應(yīng)后，用熒光HPLC進行檢測。檢測條件如下：流動相為甲醇（V）：乙腈（V）=1：1，含5%的水；激發(fā)波長364nm，發(fā)射波長470nm；流速：1.0 m

3、L·min-1；柱溫：室溫；進樣量：20μL。IVM和AVM的保留時間為8.73min和6.16min，色譜峰分離良好，無其他雜質(zhì)峰干擾。
　　其次，建立了血漿中三氯苯達唑（TCBZ）及其代謝產(chǎn)物三氯苯達唑亞砜（TCBZSO）和三氯苯達唑砜（TCBZSO2）的HPLC同步檢測方法，以甲苯咪唑（MBZ）作為內(nèi)標(biāo)物，以甲醇作為血漿蛋白的沉淀劑，血漿樣品通過前處理后經(jīng)HPLC紫外檢測器進行檢測。檢測條件如下：流動相為乙腈/醋酸銨（0.0

4、25M，pH6.6）（A/B）梯度洗脫，即0.01min－5.00min，A/B=52/48～60/40；5.00min－13.00min，A/B=60/40～70/30；13.00min－20.00min，A/B=70/30～52/48；流速1.0mL/min；檢測波長：295nm；柱溫：室溫；進樣量：50μL。TCBZ、TCBZSO、TCBZSO2、MBZ的保留時間分別為10.044min、5.535min、4.708min、3.4

5、20min，各目標(biāo)物色譜峰分離良好。
　　利用以上方法測定給藥后各時間點IVM、TCBZ、TCBZSO以及TCBZSO2在血漿樣品中的濃度，并運用Phoenix WinNonlin藥動學(xué)軟件按非房室模型方法處理試驗數(shù)據(jù)，計算出藥動學(xué)各參數(shù)。結(jié)果表明：聯(lián)合應(yīng)用IVM和TCBZ后，IVM的血漿藥物峰濃度(Cmax)、藥時曲線下面積（AUC）均極顯著低于單獨用藥組，表觀分布容積（Vd）、消除半衰期（T1/2ke）、體清除率（CLb）則極