基于外翻腸囊法的補(bǔ)鋅制劑生物利用率評(píng)價(jià)研究.pdf

1、快速、高效、客觀的評(píng)價(jià)各種微量元素補(bǔ)充劑的生物利用率，對(duì)于規(guī)范保健食品（劑）生產(chǎn)、消費(fèi)和監(jiān)管具有重要意義。以補(bǔ)鋅制劑為例，市場(chǎng)經(jīng)歷了無機(jī)鋅（硫酸鋅為代表）、葡萄糖酸鋅、甘草鋅及氨基酸螯合鋅、蛋白鋅等有機(jī)鋅過程，然而，對(duì)其生物利用率的評(píng)價(jià)無論是評(píng)價(jià)方法還是結(jié)果均十分混亂。如評(píng)價(jià)方法體內(nèi)的有平衡試驗(yàn)法、同位素示蹤法、原位結(jié)扎灌注腸段法、原位體腸灌流法;體外法則有體外灌注腸段法、外翻腸囊法、小腸刷狀緣膜微粒法、細(xì)胞培養(yǎng)法等。本文以幾種市售鋅元

2、素營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑為研究對(duì)象，利用雞回腸構(gòu)建了外翻腸囊模型，通過灌注不同時(shí)間、不同濃度鋅制劑的吸收效率，探索外翻腸囊法作為微量元素營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑生物利用率評(píng)價(jià)方法的可行性及具體應(yīng)用，以期為相關(guān)研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　本研究主要結(jié)果如下:
　　1構(gòu)建了基于肉仔雞回腸的外翻腸囊模型。通過頸部宰殺肉仔雞45只，解剖取其回腸，處理外翻后，制成肉仔雞回腸外翻腸囊模型90只（一只回腸制成兩只外翻腸囊）。選取無機(jī)鋅（硫酸鋅）、有機(jī)鋅（氨基酸螯合鋅）

3、對(duì)模型進(jìn)行評(píng)估。結(jié)果表明:(1)空白組與試驗(yàn)組漿膜液終體積并且無顯著性差異(P＞0.05)，隨時(shí)間變化趨勢(shì)具有明顯線性關(guān)系，線性擬合所得相關(guān)系數(shù)R2=0.909。(2)硫酸鋅培養(yǎng)5、15、30、45、60min吸收率極顯著增加(P＜0.01)，吸收率隨時(shí)間變化經(jīng)線性擬合后R2=0.990，并且腸囊在15min時(shí)對(duì)硫酸鋅的吸收速率達(dá)到最大;氨基酸螯合鋅在前30min內(nèi)吸收率增加明顯(P＜0.01)，隨后變化趨于平緩，60min時(shí)再次出現(xiàn)增

4、加的趨勢(shì)，吸收率隨時(shí)間變化經(jīng)線性擬合后R2=0.947，在30min內(nèi)腸囊對(duì)氨基酸螯合鋅吸收效果較好。由此可知試驗(yàn)所構(gòu)建的外翻腸囊模型具有較好的重復(fù)性、準(zhǔn)確性，可用以評(píng)價(jià)不同補(bǔ)鋅制劑的生物利用率。
　　2補(bǔ)鋅制劑在不同濃度、不同時(shí)間培養(yǎng)后的吸收規(guī)律。根據(jù)不同補(bǔ)鋅制劑的單次推薦劑量設(shè)置本試驗(yàn)中灌注腸囊的四個(gè)鋅濃度水平，分別為:5.28，14.12，20，32.4(μg/ml)，培養(yǎng)腸囊10、20、30、40min。
　　硫酸鋅

5、:吸收率都隨著時(shí)間、濃度而增加。以鋅濃度為32.4μg/ml（推薦量）下吸收率為100％。當(dāng)鋅濃度為5.28μg/ml時(shí)，培養(yǎng)4個(gè)時(shí)間吸收率可達(dá)8.74％～19.13％;當(dāng)鋅濃度為14.12μg/ml時(shí)，吸收率達(dá)到27.01％～45.52％;當(dāng)鋅濃度為20μg/ml時(shí)，吸收率達(dá)到63.61％～71.10％。由此可知，硫酸鋅制劑在產(chǎn)品推薦攝入量下吸收效果最佳。腸囊對(duì)鋅的擴(kuò)散系數(shù)P在10min時(shí)達(dá)到最大值為1.936±0.292cm2/mi

6、n，此時(shí)腸囊對(duì)硫酸鋅吸收最敏感。
　　葡萄糖酸鋅:4個(gè)濃度水平下，吸收率隨著時(shí)間而增加。在鋅濃度為32.4μg/ml時(shí)，培養(yǎng)時(shí)間超過20min后吸收率反而低于14.12和20μg/ml鋅濃度水平。以鋅濃度為14.12μg/ml（推薦量）下吸收率為100％。當(dāng)鋅濃度為5.28μg/ml時(shí)，培養(yǎng)4個(gè)時(shí)間吸收率達(dá)到18.30％～22.21％;當(dāng)鋅濃度為20μg/ml時(shí)，吸收率達(dá)到115.20％～121.11％;當(dāng)鋅濃度為32.4μg/m

7、l時(shí)，吸收率達(dá)到138.23％～92.93％。由此可知，葡萄糖酸鋅制劑在產(chǎn)品推薦劑量及鋅濃度為20μg/ml時(shí)吸收效果都較好。P在10min時(shí)達(dá)到最大值為3.867±0.248 cm2/min，此時(shí)腸囊對(duì)葡萄糖酸鋅吸收最敏感。
　　鈣鐵鋅:較高的3個(gè)濃度水平之間，吸收率變化不顯著(P＞0.01)，都隨著時(shí)間表現(xiàn)為先增后減再增的趨勢(shì)。以鋅濃度為5.28μg/ml（推薦量）下吸收率為100％。當(dāng)鋅濃度為14.12μg/ml時(shí)，培養(yǎng)4個(gè)

8、時(shí)間吸收率分別為89.84％、115.10％、75.38％、122.60％;當(dāng)鋅濃度為20μg/ml時(shí)，吸收率分別為122.85％、129.18％、97.74％、60.58％;當(dāng)鋅濃度為32.4μg/ml時(shí)，吸收率分別達(dá)到94.78％、127.44％、65.60％、101.92％。由此可知，鈣鐵鋅制劑隨著鋅元素濃度的增加，其在腸囊中的吸收效果并不穩(wěn)定。P在20min時(shí)達(dá)到最大值為1.063±0.212cm2/min，此時(shí)腸囊對(duì)鈣鐵鋅吸收

9、最敏感。
　　甘草鋅:在鋅最大濃度32.4μg/ml時(shí)，吸收率隨時(shí)間表現(xiàn)為先增后減的趨勢(shì)。以鋅濃度14.12μg/ml（推薦量）下吸收率為100％。當(dāng)鋅濃度為5.28μg/ml時(shí)，培養(yǎng)4個(gè)時(shí)間吸收率可達(dá)34.66％～47.35％;當(dāng)鋅濃度為20μg/ml時(shí)，吸收率可達(dá)119.82％～100.97％;當(dāng)鋅濃度為32.4μg/ml時(shí)，吸收率分別達(dá)到104.21％、101.40％、79.14％、76.21％。由此可知，甘草鋅制劑在推薦劑

10、量及鋅濃度為20μg/ml時(shí)具有較好的吸收效果。P在10min時(shí)達(dá)到最大值為3.447±0.230 cm2/min，此時(shí)腸囊對(duì)甘草鋅吸收最敏感。
　　氨基酸螯合鋅:在鋅最大濃度32.4μg/ml下，吸收率隨時(shí)間表現(xiàn)為先增后平再增再減的趨勢(shì)。以鋅濃度為20μg/ml（推薦量）下吸收率為100％。當(dāng)鋅濃度為5.28μg/ml時(shí)，培養(yǎng)4個(gè)時(shí)間吸收率可達(dá)27.77％～36.17％;當(dāng)鋅濃度為14.12μg/ml時(shí)，吸收率可達(dá)52.57％～