柞蠶模式識(shí)別受體PGRP-A的序列分析及重組表達(dá).pdf

1、昆蟲的免疫系統(tǒng)與脊椎動(dòng)物不同,它沒有T細(xì)胞和B細(xì)胞,沒有脊椎動(dòng)物所具有的補(bǔ)體系統(tǒng)。盡管它沒有獲得性免疫系統(tǒng),但是卻具有可以對(duì)病原微生物做出快速和有效應(yīng)答的先天性免疫系統(tǒng)。肽聚糖識(shí)別蛋白(PGRP)是重要的先天性免疫基因家族,是一種重要的模式識(shí)別受體,它可以識(shí)別微生物表面的肽聚糖(PGN)并啟動(dòng)免疫反應(yīng)。迄今為止,在多種昆蟲和其他動(dòng)物中都發(fā)現(xiàn)了PGRP,盡管這些PGRP在進(jìn)化過程中,結(jié)構(gòu)上表現(xiàn)的很保守,但是在功能和表達(dá)模式方面確是不一樣的

2、。
　　柞蠶(Antheraeapernyi)是鱗翅目大蠶蛾科柞蠶屬的一種絹絲類昆蟲,除了作為紡織工業(yè)原料利用外,還有很高的藥用和食用等經(jīng)濟(jì)價(jià)值。為了能夠更全面的了解PGRP在鱗翅目昆蟲先天性免疫中的功能,本實(shí)驗(yàn)以柞蠶為研究對(duì)象,克隆鑒定出一種肽聚糖識(shí)別蛋白,將其命名為PGRP-A,利用分子生物學(xué)和生物信息學(xué)方法對(duì)柞蠶PGRP-A基因進(jìn)行研究,獲得的主要結(jié)果如下:
　　1.PGRP-A基因的克隆及序列分析:
　　設(shè)計(jì)簡(jiǎn)

3、并性引物,經(jīng)PCR克隆擴(kuò)增獲得了1個(gè)新基因PGRP-A的全長(zhǎng)序列。該序列全長(zhǎng)961bp,包括由40個(gè)核苷酸組成的5’端非編碼區(qū)(5’UTR)、由582個(gè)核苷酸組成的開放閱讀框(ORF)編碼193個(gè)氨基酸,以及由339個(gè)核苷酸組成的3’端非編碼區(qū)(3’UTR)。其中,編碼氨基酸的預(yù)測(cè)分子量大小為22.0kDa,等電點(diǎn)為7.368。構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明柞蠶PGPR-A氨基酸序列與印度柞蠶PGRP的同源性最高。
　　2.PGRP-A基