模式識別受體介導(dǎo)的小鼠睪丸和附睪的天然抗病毒反應(yīng).pdf

1、背景與目的:病毒感染引起的睪丸炎和附睪炎，是破壞男性生育能力的重要因素。目前這兩個生殖器官的天然抗病毒免疫機(jī)制尚不清楚，本論文主要研究模式識別受體介導(dǎo)的睪丸與附睪天然抗病毒機(jī)制，為預(yù)防和治療相關(guān)疾病提供新線索。
　　材料與方法:以小鼠為模型，用poly(I∶C)和HSV60模擬病毒感染，利用實(shí)時定量RT-PCR檢測基因的mRNA水平，Western blot測定基因的蛋白水平，免疫組化染色定位蛋白的分布，ELISA檢測細(xì)胞因子和睪

2、酮的分泌。利用TLR3基因敲除(TLR3-/-)小鼠和RNA干擾技術(shù)確證基因的功能。
　　結(jié)果:睪丸Leydig細(xì)胞組成性表達(dá)病毒核酸受體MDA5、RIG-Ⅰ和p204，其中MDA5也在圓形和長形精子中表達(dá)。MDA5和RIG-Ⅰ可以被poly(I∶C)激活，p204可以被HSV60激活，誘導(dǎo)睪丸抗病毒反應(yīng)。附睪上皮細(xì)胞組成性表達(dá)多個病毒核酸受體，包括TLR3、RIG-Ⅰ和DAI。p204與cGAS可以被HSV60誘導(dǎo)表達(dá)。TLR3

3、和RIG-Ⅰ可以被poly(I∶C)激活，而DAI、p204與cGAS可以被HSV60激活，啟動附睪天然抗病毒反應(yīng)。
　　在睪丸及附睪細(xì)胞中，poly(I∶C)和HSV60都能誘導(dǎo)Ⅰ型干擾素和抗病毒蛋白ISG15、OAS1和MX1的表達(dá)。poly(I∶C)可以顯著上調(diào)炎癥因子TNF-α和MCP-1的表達(dá)，但HSV60并不影響TNF-α和MCP-1的表達(dá)。在TLR3-/-細(xì)胞中或用siRNA敲低RIG-Ⅰ、DAI、p204或cGAS