三角帆蚌（Hyriopsis cumingii Lea）外套膜外表皮組織培養(yǎng)及其生物學特性研究.pdf

1、上海水產(chǎn)大學碩士學位論文三角帆蚌（Hyriopsis cumingii Lea）外套膜外表皮組織培養(yǎng)及其生物學特性研究姓名：李巍申請學位級別：碩士專業(yè)：水產(chǎn)養(yǎng)殖指導教師：施志儀2003.6.1疊生長現(xiàn)象。根據(jù)組織塊培養(yǎng)和細胞培養(yǎng)實驗及鈣含量測定實驗的結(jié)果，我們選擇原代組織塊培養(yǎng)得到的游離外表皮細胞為材料進行了傳代培養(yǎng)。在實驗中觀察到了傳代細胞的貼壁和增殖，這證明大量有珍珠質(zhì)分泌活性的細胞在體外培養(yǎng)條件F 是有可能得到的。我們還進行7 ，

2、原代培養(yǎng)細胞的幾個生物學特性的研究。通過染色體的觀察實驗，發(fā)現(xiàn)在體外組織培養(yǎng)中得到的游離細胞具有2 n = 3 8染色體，與汪曉晶等人的實驗中的結(jié)論一致，這證明體外培養(yǎng)的游離細胞具有與體內(nèi)細胞同樣的染色體數(shù)目：通過流式細胞儀的檢測，在2 4 小時，S 期細胞為0 ．5 ％，G ：／M 期為2 ．9 1 ％：在6 d ，s 期細胞為1 ．2 2 ％，G ：／M 期為3 ．1 3 ％；在在l O d ，s 期細胞為2 ．8 1 ％，G ：／

3、M 期為3 ．0 7 ％，表明隨著時間增加進入分裂增殖期的細胞逐漸增多，體外培養(yǎng)的游離細胞具有正常的細胞周期，能夠進行分裂增殖；通過透射電鏡的觀察，觀察到細胞內(nèi)與物質(zhì)合成和分泌有關的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、多聚游離核糖體、線粒體，還觀察到與珍珠C a C O ，霰石結(jié)晶有關的大顆粒物質(zhì)，證明培養(yǎng)的外套膜外表皮細胞和體內(nèi)外套膜外表皮細胞一一樣具有分泌珍珠質(zhì)的活性。根據(jù)以上的實驗結(jié)果，在體外用原代組織塊培養(yǎng)獲得游離細胞，再進行傳代培養(yǎng)，得到大量的有分泌