菜用大豆轉(zhuǎn)錄因子基因GmMYB103的表達(dá)及功能初步分析.pdf

1、MYB轉(zhuǎn)錄因子被證實(shí)廣泛參與類黃酮代謝途徑的調(diào)控，植物中MYB家族基因的表達(dá)受到多種逆境條件的誘導(dǎo)，在植物異黃酮代謝途徑中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。因此，對(duì)大豆MYB轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行研究，明確其在大豆類黃酮代謝中的地位和作用，闡明其功能，將有助于揭示大豆異黃酮的調(diào)控機(jī)理。
　　 本論文利用PCR技術(shù)克隆到GmMYB103基因，在前期研究基礎(chǔ)上，分別對(duì)其核酸序列和所編碼蛋白的結(jié)構(gòu)特征及其表達(dá)特性進(jìn)行了進(jìn)一步的分析鑒定。將目的基因GmMYB1

2、03導(dǎo)入到大豆子葉中進(jìn)行過量表達(dá)，進(jìn)一步研究鑒定GmMYB103對(duì)異黃酮生物合成方面的調(diào)節(jié)作用，主要結(jié)論如下:
　　 1.利用RT-PCR技術(shù)克隆到大豆GmMYB103基因，其開放閱讀框(ORF)長849bp，編碼282個(gè)氨基酸，含有2個(gè)SANT結(jié)合域（MYB結(jié)構(gòu)域），GmMYB103的MYB結(jié)合域分別位于10-62、63-117氨基酸。通過利用蛋白質(zhì)序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)生樹，結(jié)果顯示本研究中大豆的GmMYB103與百脈根的LjMYB

3、103、百脈根的LjMYB101、大豆的GmMYB101編碼的蛋白距離較近，共同組成一個(gè)分支，親緣關(guān)系最近，具有較高的同源性，推測(cè)GmMYB103與它們具有相似的生物學(xué)功能。
　　 2.通過半定量RT-PCR方法研究GmMYB103基因在大豆組織中的表達(dá)情況，結(jié)果顯示GmMYB103在大豆莖的結(jié)莢期，葉片和花中均有表達(dá)，但在葉片結(jié)莢期的表達(dá)量極低，而在花中的表達(dá)量極高。
　　 3.檢測(cè)到了GmMYB103過表達(dá)對(duì)苯丙氨酸