斗嫁(蟲戚)配子體外促熟、早期胚胎發(fā)育及消化器官組織學研究.pdf

1、本論文以斗嫁蜮為研究對象，通過解剖成熟性腺在體外環(huán)境因子的催熟或刺激下促使卵子成熟以及精子的激活，人工授精進行早期胚胎發(fā)育研究，為帽貝科動物性細胞催熟和激活提供理論依據(jù)；利用石蠟切片技術(shù)對消化器官進行組織學研究，為帽貝科動物人工增養(yǎng)殖提供基礎(chǔ)資料。
　　1.斗嫁()精子、卵子激活條件的研究：
　　(1)選取性腺飽滿的雄貝作為材料。選擇氨水作為調(diào)節(jié)激活劑，篩選出能激活精子的最佳pH，即精子的激烈運動時間和激活率都最好。篩選出最

2、佳pH后，在這個基礎(chǔ)上，進一步研究精子在不同鹽度條件下的最佳激活值。最后研究溫度對精子激活的影響。結(jié)果顯示：在水溫18℃、鹽度32、pH≤8.5時，斗嫁蜮精子的激活率與活力均較低，pH在9～10.5之間時激活率與活力較高，pH=10時的激活率最高(p<0.05)；在水溫22℃、鹽度32時，斗嫁蜮精子在pH=8～10.5時均能被激活，且pH=10時激活率最高(p<0.05)，激活率與活力均比18℃時高。在水溫18℃、pH=10時，精子在鹽

3、度12.8～40均能被激活，鹽度32～34激活率和活力最高(p<0.05)；且水溫22℃的激活率與活力均比18℃時高。在pH為9.5或10的氨海水中精子在10～45℃中都能被激活，在20～25℃時激活率較高，同樣的溫度下，精子在pH10氨海水比pH9.5氨海水中激活率高5.2％。
　　(2)選取性腺飽滿的雌貝進行解剖。選擇氨水作為催熟劑，將解剖卵浸泡于氨海水中，取樣觀察并記錄卵子成熟情況，將已成熟卵子和活力強的精子混合進行授精，檢

4、驗體外催熟精卵受精率以及發(fā)育到擔輪幼蟲率。實驗發(fā)現(xiàn)，解剖卵在海水和氨海水中都可以達到成熟，并且可以受精，自然海水中的催熟率比氨海水中低，在水溫17℃中，卵子在氨海水中浸泡10 min出現(xiàn)膠質(zhì)膜不完整個體，28 min出現(xiàn)無膠質(zhì)膜個體，經(jīng)過61 min浸泡后無膠質(zhì)膜個體達到86.4％；卵子在自然海水中浸泡破裂的時間比氨海水中長，27 min才出現(xiàn)膠質(zhì)膜不完整個體，64 min后無膠質(zhì)膜個體只有61.9％。解剖授精受精率最高在卵子促熟后繼續(xù)

5、浸泡在海水中30 min內(nèi)，最適范圍卵子浸泡后25.30 min，擔輪幼蟲率加氨水組為47.7％，海水組僅為18.3％，氨海水對卵子的促熟效果顯著。
　　2.斗嫁()早期胚胎發(fā)育研究：在第二章實驗結(jié)果的基礎(chǔ)上進行人工授精、以及人工催產(chǎn)的研究。結(jié)果表明：斗嫁()可以通過人工催產(chǎn)進行排放精卵也可以進行人工解剖授精，其中以人工催產(chǎn)法最好，受精率高，畸形率低，通過解剖授精和人工催產(chǎn)兩種方法對比，受精卵均可以發(fā)育到匍匐期。
　　3.斗

6、嫁蜮消化器官組織學研究：本實驗利用石蠟切片技術(shù)及電子顯微鏡，研究了斗嫁蜮消化器官組織結(jié)構(gòu)。斗嫁()消化器官由消化道和消化腺兩部分組成，口區(qū)、食道、嗉囊、胃、腸和肛門組成消化道；消化腺主要為肝胰腺?？谇恢杏幸粚︻€片，一個對稱的齒舌軟骨，一條長齒舌，包裹在齒舌囊中，通過肌肉束和齒舌軟骨相連；食道壁由單層柱狀上皮細胞構(gòu)成，食道中段上皮細胞有單細胞腺體存在；嗉囊黏膜上皮由單層柱狀上皮細胞構(gòu)成，黏膜下層很薄，基層主要由環(huán)肌構(gòu)成；胃黏膜上皮由單層柱