PCR_mtDNA技術鑒別檢測固原雞源性成分的研究.pdf

1、本研究以寧夏地方品種固原雞(白羽、紅羽、麻羽)、引進肉雞品種AA雞和蛋用品種羅曼雞為研究對象，利用PCR(聚合酶鏈式反應)擴增技術，以GenBank家雞mtDNA(登錄號為：AB003323)全序列為基礎，設計用于擴增固原雞、AA雞、羅曼雞線粒體DNA控制區(qū)(D-LOOP)、細胞色素b脫復輔基酶(Cytb)、細胞色素C氧化酶亞基I(COI)、12srRNA基因序列限制性片段的特異性引物，并對PCR擴增產物進行測序。通過生物學軟件對所得序

2、列進行比對，分析品種間的遺傳差異，探討線粒體不同基因在鑒別檢測雞品種源性成分利用方面的可行性，篩選出適合鑒別檢測固原雞源性成分的可靠目的基因。研究結果表明：
　　 1 D-LOOP基因發(fā)現(xiàn)14個變異位點，3個缺失/插入位點及11個轉換位點，其中固原雞與AA雞、羅曼雞在品種間發(fā)現(xiàn)6個變異位點；從雞在490位點缺失了一個C堿基，在199位點發(fā)現(xiàn)一個特異性變異位點，發(fā)生了C/T的轉換；羅曼雞在860位點發(fā)現(xiàn)一個特異性變異位點，插入了一

3、個C堿基。固原雞三個類群(白羽、紅羽、麻羽)內發(fā)現(xiàn)6個變異位點。紅羽在490位點缺失了一個C堿基；白羽在167位點和1217位點發(fā)生了T/C的轉換，243位點和256位點發(fā)生了C/T的轉換，在15位點發(fā)現(xiàn)一個特異性變異位點，插入了一個A堿基。
　　 2 COI基因在品種間發(fā)現(xiàn)3個變異位點，分別是在114位點和156位點發(fā)生了T/C的轉換以及255位點發(fā)生了A/G轉換。固原雞三個類群(白羽、紅羽、麻羽)內沒有發(fā)現(xiàn)變異位點。