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文檔簡介
1、AdipoR1基因是骨骼肌中表達豐度最高且與球狀脂聯(lián)素親和力最強的細胞因子,主要介導球狀脂聯(lián)素參與糖類和脂質(zhì)代謝,維持機體穩(wěn)態(tài),與體內(nèi)脂肪累積呈負相關,與胰島素抗性、抗動脈粥樣硬化等免疫反應直接或間接相關。AdipoR1基因在組織中表達的高低直接決定脂聯(lián)素基因在相關組織中發(fā)揮生理功能的作用強度。miRNAs是一類來源于染色體非編碼區(qū)大小為20nt左右的小RNA分子,其作用是在轉錄后水平上對靶基因的表達進行調(diào)控,主要是抑制靶基因的表達。m
2、iRNAs在動物的基因表達調(diào)控、信號轉導、細胞增殖和分化、細胞凋亡、機體癌癥防御等過程中發(fā)揮著重要的生理學功能。miRNAs尤其作為一種重要的轉錄后調(diào)解新陳代謝因子,參與機體能量的動態(tài)平衡,調(diào)節(jié)脂肪的分化。AdipoR1基因在鴨的各個組織中表達譜還未見詳細報道,鑒于AdipoR1介導的脂聯(lián)素與體脂累積呈負相關,在治療肥胖的臨床醫(yī)學上有著十分中的意義,由此我們設計了本實驗,檢測AdipoR1基因在鴨的組織表達譜和時空表達譜,同時探討miR
3、-148a對鴨AdipoR1的調(diào)控作用。旨在為鴨的選育和脂肪累積的調(diào)控機理研究提供參考信息。
采用Real-Time PCR法,以β-actin為內(nèi)參,檢測AdipoR1基因在10周齡連城白鴨、金陵白鴨、櫻桃谷鴨和莆田黑鴨4個品種鴨胸肌、腿肌、腎等8個組織中的表達譜,及在胸肌、腿肌和肝臟中2、4、6、8、10周齡的時空表達譜。主要結果如下:
1.AdipoR1基因在四個品種鴨胸肌組織不同時間點的表達量波動很大,但基本
4、上都呈波浪式的變化。4周齡和8周齡時表達量顯著高于其他點的(P<0.05)。10周齡時表達量均顯著或極顯著地低于8周齡的,此時連城白鴨的降幅最小,表達量顯著高于其他三個品種鴨的(P<0.05)。
2.AdipoR1基因在四種不同品種鴨腿肌組織中的表達規(guī)律一致。早期表達量都很低,隨著腿部肌肉的快速增長,4周齡時AdipoR1基因表達累積量迅速升高,并極顯著地高于其他各個時間點的(P<0.01),其中櫻桃谷鴨的表達量最高,是金陵白
5、鴨的22倍,連城白鴨的10倍。后期表達趨于水平,并持續(xù)在較低的豐度。2、6、8、10周齡時,金陵白鴨腿肌中的表達量均介于兩親本連城白鴨和櫻桃谷鴨的中間水平,正體現(xiàn)了雜種優(yōu)勢。
3.AdipoR1基因在四個品種鴨肝臟組織中表達規(guī)律并不一致,具有品種差異性。金陵白鴨和櫻桃谷鴨的表達規(guī)律基本一致,前期表達量較低,后期出現(xiàn)累積量的上揚;連城白鴨和莆田黑鴨的表達量波動較大,趨勢迥異。連城白鴨是低起點累積,多以高累積量出現(xiàn),4周齡時表達量
6、最高;而莆田黑鴨是高起點,10周齡時表達量最高,且極顯著高于其他三個品種鴨10周齡的(P<0.01)。
4.AdipoR1基因在10周齡大小四個品種鴨腺胃、腎、肌胃、腸、肝臟、胸肌、腿肌和心肌8個組織中的表達譜一致。心肌、腸和肌胃中的表達很微量,腿肌中的表達量與肝臟、腺胃和腎的無顯著差異,胸肌組織中表達量最高,是其他組織表達量的上百倍甚至上千倍。
運用套式PCR技術,克隆了鴨AdipoR1基因的3'UTR片段,大小為
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