優(yōu)化附著基對仿刺參(Apostichopus japonicus)幼體附著變態(tài)的影響.pdf

1、仿刺參養(yǎng)殖業(yè)迅速發(fā)展的同時,幼體附著變態(tài)率普遍偏低,附著變態(tài)初期幼體易患“滑板癥”等問題嚴重影響著仿刺參養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。針對其他無脊椎動物幼體附著變態(tài)的研究表明,附著基的表面材質(zhì)與附著基上的生物群落是影響幼體附著變態(tài)的兩個重要因素(Zobell,C.E,1935),而關(guān)于仿刺參幼體附著變態(tài)方面的研究較少。本研究對仿刺參幼體附著基表面材質(zhì)進行了優(yōu)化,同時采集仿刺參養(yǎng)殖池塘以及自然海區(qū)的附著細菌,篩選出能夠誘導(dǎo)仿刺參幼體附著變態(tài)的高活性細菌。

2、將表面材質(zhì)優(yōu)化附著基同篩選的高誘導(dǎo)活性細菌結(jié)合使用,以進一步提高仿刺參幼體的附著變態(tài)率,為仿刺參苗種生產(chǎn)提供技術(shù)支持。
　　實驗中利用環(huán)氧樹脂膠將450-1000μm、330-450μm以及250-330μm三個粒級的蠣殼粉和甘蔗渣分別粘附于透明聚乙烯波紋板表面,形成表面材質(zhì)優(yōu)化附著基。將表面材質(zhì)優(yōu)化附著基在成參養(yǎng)殖池中分別懸掛0、5和10天后取回,在實驗室內(nèi)進行實驗,分析不同類型的表面材質(zhì)優(yōu)化附著基對仿刺參幼體附著變態(tài)的誘導(dǎo)效果

3、。結(jié)果表明,仿刺參幼體在各優(yōu)化附著基上的附著變態(tài)率同其懸掛天數(shù)成正比,且250-330μm蠣殼粉優(yōu)化的附著基[蠣殼粉(S)]誘導(dǎo)仿刺參幼體附著變態(tài)的效果最明顯。將表面材質(zhì)優(yōu)化附著基投入育苗池內(nèi)應(yīng)用實驗的結(jié)果同樣表明250-330μm的蠣殼粉優(yōu)化的附著基能夠顯著誘導(dǎo)幼體的附著變態(tài),同波紋板附著基相比,其表面仿刺參幼體的附著變態(tài)率明顯提高。
　　分離篩選得到可以有效形成菌膜的16株附著細菌,利用16S rDNA方法對其進行了鑒定,并分

4、析了其對仿刺參幼體附著變態(tài)的誘導(dǎo)效果。結(jié)果表明,4株細菌具有明顯誘導(dǎo)效果,其中3株屬于Pseudoalteromonas屬,另外一株屬于Alteromonas屬。在細菌附著密度為(1.07-7.84)×106、(6.95-8.48)×107、(1.01-3.61)×108cells/cm2時,4株細菌誘導(dǎo)下的仿刺參幼體附著變態(tài)率分別為為32.50-37.50％、30.00-47.50％、57.50-60.00％,明顯高于對照組(P＜0.

5、05)。
　　培養(yǎng)前述4株細菌并使其附著于250-330μm蠣殼粉優(yōu)化的表面材質(zhì)優(yōu)化附著基表面,研究了兩者對仿刺參幼體附著變態(tài)的綜合誘導(dǎo)效果。結(jié)果表明,無論是波紋板還是蠣殼粉(S),當(dāng)其表面附著有4株細菌中的任何一株形成的單種菌膜后,其表面的仿刺參幼體的附著變態(tài)率明顯高于空白波紋板(10.00±8.20％)和無菌膜附著的的蠣殼粉(S)(25.00±5.77％)。分析分別附著有三株P(guān)seudoalteromonas屬細菌的波紋板同對

6、應(yīng)的蠣殼粉(S)表面仿刺參幼體的附著變態(tài)率可知,細菌膜中細菌密度對仿刺參幼體的附著變態(tài)率的影響差異不顯著。而當(dāng)附著細菌Alteromonas sp.1密度達到108cells/cm2時,仿刺參幼體在蠣殼粉(S)表面的附著變態(tài)率(77.50±2.20％)明顯高于其在波紋板表面的附著變態(tài)率(62.50±5.00％)。蠣殼粉(S)同Alteromonas sp.1結(jié)合使用使得仿刺參幼體的附著變態(tài)率高于其與其他細菌結(jié)合使用(P＜0.05)。故認

7、為250-330μ m蠣殼粉同Alteromonas sp.1結(jié)合是最佳的附著基優(yōu)化組合。
　　利用蠣殼粉(S)同Alteromonas sp.1結(jié)合使用的應(yīng)用示范實驗表明有Alteromonas sp.1結(jié)合的蠣殼粉(S)表面幼體附著變態(tài)密度為(75.00±3.82)ind/dm2,顯著高于無細菌附著的波紋板(49.00±6.83 ind/dm2)、無細菌附著的優(yōu)化附著基(54.00±4.00 ind/dm2)以及有細菌附著的波

8、紋板(64.00±3.26ind/dm2)表面的附著變態(tài)密度。
　　綜上所述:利用250-330μm蠣殼粉優(yōu)化的聚乙烯波紋板附著基可使幼體附著變態(tài)率提高50％;Alteromonas sp.1和3株P(guān)seudoalteromonas屬細菌能使幼體附著變率平均提高58％;Alteromonas sP.1同250-330μm蠣殼粉優(yōu)化的聚乙烯波紋板附著基結(jié)合使用,則能使幼體的附著變態(tài)率提高到對照組的7倍,示范應(yīng)用試驗中,其提高比例為5