利用組織培養(yǎng)技術(shù)研究廣藿香的化感自毒作用.pdf

1、廣藿香Pogostemon cablin(Blanco) Benth.是廣東省的大宗道地藥材之一，其連年栽培的減產(chǎn)反映出它存在連作障礙，而植物化感自毒作用是植物連作障礙的重要原因之一。本論文采用組織培養(yǎng)技術(shù)，對(duì)廣藿香的化感自毒作用及其自毒物質(zhì)進(jìn)行研究，研究其不同器官水提液、根系分泌物對(duì)其組培苗、馴化幼苗以及蘿卜等植物的化感自毒和化感作用。采用HPLC法對(duì)廣藿香培養(yǎng)基中的酚酸類(lèi)化感物質(zhì)成分進(jìn)行了初步鑒定，并將所測(cè)四種單一酚酸和混合酚酸的高

2、中低濃度加入培養(yǎng)基中，通過(guò)生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證各酚酸的化感效應(yīng)。主要研究結(jié)果如下：
　　1.建立了廣藿香高效的愈傷組織誘導(dǎo)和分化再生植株體系：以廣藿香葉為外植體，MS+6-BA(2.0 mg·L–1)培養(yǎng)基誘導(dǎo)愈傷組織；MS+6-BA(0.1 mg·L–1)培養(yǎng)基誘導(dǎo)叢生芽；MS+6-BA（0.1 mg·L–1）+NAA（0.05mg·L–1）培養(yǎng)基的壯苗效果較好；1/2MS+IBA0.2 mg·L–1生根效果好。
　　2.

3、廣藿香不同器官水提液對(duì)其組培苗及馴化幼苗均產(chǎn)生化感自毒作用，且隨處理濃度增加，對(duì)受體植株的株高、根長(zhǎng)、株鮮重、根鮮重的抑制作用增強(qiáng)。廣藿香莖、葉水提液0.01 g·mL-1、0.05 g·mL-1、0.1 g·mL-1三種濃度處理下，其組培苗地上植株及根系的POD、CAT、SOD活性均產(chǎn)生變化，地上植株 PAL活性升高、根系PAL活性均低于對(duì)照，MDA含量及 H2O2含量呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，植株體內(nèi)總黃酮和總揮發(fā)油含量降低，且高濃度效應(yīng)顯著。

4、
　　3.廣藿香組培苗根系分泌物抑制自身組培苗和廣金錢(qián)草幼苗的生長(zhǎng)；低濃度促進(jìn)蘿卜幼苗生長(zhǎng)，高濃度抑制其生長(zhǎng)。0.4 g·mL-1和1.0 g·mL-1廣藿香連作土壤根系分泌物水提液對(duì)組培苗的株高、主根長(zhǎng)、鮮重和根數(shù)都存在明顯的抑制作用，水提液濃度越高，抑制生長(zhǎng)作用越強(qiáng)，存在明顯的濃度效應(yīng)。隨著根系分泌物水提液濃度的增加，組培苗中總黃酮和總揮發(fā)油含量呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。
　　4.采用HPLC的方法檢測(cè)出廣藿香根系分泌物中的四種酚酸

5、類(lèi)化合物，含量分別為對(duì)羥基苯甲酸1.524×10-3 mg·mL-1、香草酸1.783×10-3mg·mL-1、咖啡酸1.113×10-3mg·mL-1、阿魏酸5.772×10-3mg·mL-1。并從驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中得出以上四種不同濃度單一酚酸和混合酸對(duì)組培苗的株高、根長(zhǎng)、株鮮重、根鮮重、PAL活性和MDA含量均有不同程度的化感效應(yīng)。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：在同一高濃度和中濃度處理下，混合酚酸對(duì)廣藿香組培苗的綜合化感效應(yīng)的抑制作用強(qiáng)于四種單一酚酸，