海帶配子體克隆培養(yǎng)技術(shù)研究.pdf

1、該文主要探討了海帶配子體克隆的大規(guī)模培養(yǎng)條件,對海帶配子體克隆生長的適宜溫度、光照時間、光照強度、營養(yǎng)鹽消耗、培養(yǎng)狀態(tài)以及接種密度進行了研究,并在相對適宜條件下進行了大規(guī)模培養(yǎng)實驗,同時,對海帶配子體克隆在培養(yǎng)過程中的生長規(guī)律進行了研究.以期為克隆的生長性培養(yǎng)提供理論依據(jù)和技術(shù)支持,為海帶育苗方式從傳統(tǒng)的夏苗培育法向配子體克隆育苗轉(zhuǎn)化提供前提條件,研究結(jié)果表明:溫度是影響海帶配子體克隆生長最重要的環(huán)境因子之一,在10-15℃范圍內(nèi),配子

2、體克隆的生長速度最快,在25℃條件下,實驗中所用的海帶配子體克隆幾乎不能存活,在相同溫度、光照、營養(yǎng)鹽等條件下,細胞數(shù)基本相同的雌、雄配子體克隆的生長速度相近.光照對海帶配子體克隆的生長起著至關(guān)重要的作用,光照時間和光照強度直接影響著克隆細胞的生長.在光周期為24h/d,光照強度為1500-2500Lux條件下,克隆細胞具有最快的生長速度.通過對不同密度克隆對營養(yǎng)鹽的消耗研究,表明當克隆的密度較小時,N6ppm、P1ppm、每周換水一次

3、,可滿足其生長需要;克隆密度較大時,N10ppm、P2ppm、每周換水一次,可滿足其生長需要.在充氣懸浮培養(yǎng)條件下克隆的瞬時生長率明顯高于靜置培養(yǎng).因此,充氣懸浮培養(yǎng)具有較高的培養(yǎng)效率,適宜于進行生產(chǎn)性培養(yǎng).在不同接種密度下,克隆的生長速度不同,實驗結(jié)果表明:分瓶數(shù)量越多,克隆總重量增長越多.接種密度越低,克隆的生長速度越快.在生產(chǎn)條件許可的情況下,適當多分瓶,可提高克隆總產(chǎn)量.克隆在培養(yǎng)過程中其生長規(guī)律為:在培養(yǎng)初期,克隆密度較小時,

4、其瞬時生長率逐漸增大;隨著培養(yǎng)時間延長,克隆密度增加,生長速率逐漸下降.因此,應(yīng)及時分瓶,以保證較快的生長速度.在20L廣口瓶中,接種密度0.5g/L,提供適宜的生長條件,進行了五個重復(fù)組的克隆生長試驗,取平均值做出鮮重增長曲線,通過回歸分析得y=-0.1118+1.3108x+0.085x<'2>-0.0006x<'3>(P2=0.9985),該公式可用于估算克隆生產(chǎn)量(其中y是鮮重,x是天數(shù)).大規(guī)模培養(yǎng)結(jié)果表明在20L廣口瓶中(有