包埋脫水法冷凍保存裙帶菜配子體的研究.pdf

1、本文以裙帶菜配子體為實(shí)驗(yàn)材料，用包埋脫水法進(jìn)行超低溫和常低溫保存。將裙帶菜配子體包埋在含3％褐藻酸鈣的膠球中，在超低溫保存的過(guò)程中，研究了預(yù)培養(yǎng)中的蔗糖濃度和培養(yǎng)時(shí)間，脫水過(guò)程中的脫水速率和膠球含水量，以及化凍速度對(duì)配子體存活率和發(fā)育能力的影響；在常低溫保存的過(guò)程中研究了，溫度、含水量以及光照對(duì)配子體存活率的影響。 超低溫保存的結(jié)果表明：1蔗糖濃度和預(yù)培養(yǎng)時(shí)間對(duì)配子體存活率的影響將含裙帶菜配子體的膠球分別在0.2mol/L、0.

2、3mol/L、0.4mol/L、0.5mol/L的蔗糖培養(yǎng)基中培養(yǎng)3h、6h、9h、12h，蔗糖預(yù)培養(yǎng)對(duì)配子體的存活率影響很大，膠球在0.3mol/L的蔗糖培養(yǎng)基中培養(yǎng)9h可以獲得較高的存活率。 2膠球最適平均脫水速率對(duì)配子體存活率的影響配子體包埋后分別以含水量每小時(shí)減少1％、2.5％、5％、8％、10％、15％、25％的平均脫水速率脫水，結(jié)果裙帶菜配子體在平均脫水速率5％時(shí)獲得的存活率最高。 3膠球含水量對(duì)配子體存活率

3、的影響以5％含水量/h的脫水速率進(jìn)行脫水，使膠球的含水量為15％、25％、35％、45％、55％、65％、85％，結(jié)果膠球在最后含水量為25％的時(shí)候獲得了最高的存活率。 4化凍溫度對(duì)配子體克隆的存活率化凍溫度對(duì)配子體存活率的影響很大，研究表明，配子體在凍存管化凍時(shí)隨著化凍溫度的提高存活率提高，而在溶液中化凍時(shí)當(dāng)化凍溫度達(dá)到25℃時(shí)配子體的存活率最高，當(dāng)溫度再升高時(shí)存活率開(kāi)始下降，即溶液化凍的溫度為25℃時(shí)配子體存活率為最高(73