裙帶菜多糖的分析純化及對(duì)A549腫瘤細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo).pdf

1、多糖是一種天然的大分子化合物，是由醛糖和（或）酮糖通過糖苷鍵連接成的聚合物。多糖是構(gòu)成生物組織的重要成分，在細(xì)胞分化、識(shí)別、復(fù)制等方面發(fā)揮著重要的作用。海藻多糖（Seaweed Polysaccharide）即指海藻中所含的各種高分子碳水化合物，是一類多組份混合物，為水溶性，一般具有高粘度或凝固能力。褐藻多糖包括褐藻糖膠、褐藻淀粉和褐藻多糖，國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)證明褐藻糖膠（L-巖藻糖-4-硫酸酯）具有較強(qiáng)的生物學(xué)活性，不僅有免疫促進(jìn)和抗病毒作用

2、，而且還具有抗氧化作用和抗腫瘤活性等。大連地區(qū)裙帶菜資源極為豐富，是當(dāng)?shù)爻Ｒ姷氖秤煤Ｔ?，而且價(jià)格低廉，具有明顯的地域優(yōu)勢(shì)。 細(xì)胞凋亡是廣泛存在于組織細(xì)胞的基本生物學(xué)現(xiàn)象，是對(duì)不同有害刺激或疾病的一種特殊的細(xì)胞自殺行為。通過這種細(xì)胞自殺行為，機(jī)體消除損傷、衰老、突變的細(xì)胞，以維持生理平衡。腫瘤細(xì)胞的凋亡調(diào)控過程的失調(diào)所導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡抑制是腫瘤發(fā)生的主要原因之一，在腫瘤細(xì)胞中，幾乎所有凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)與腫瘤都存在聯(lián)系。 本

3、論文從裙帶菜多糖的提取純化分離入手，采用優(yōu)化了的多糖的提取條件，并且初步分析了多糖組分，進(jìn)一步將多糖作用于肺癌A549細(xì)胞系，檢測(cè)作用后腫瘤細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果顯示：1）多糖的提取方法：水提醇沉方法簡(jiǎn)便易行，適于大批量生產(chǎn)，有效的摒除了褐藻膠和褐藻淀粉的成分，其中最適的條件是溫度為90℃，時(shí)間為5小時(shí)，提取的多糖純度達(dá)到90%，其中采用了Sevage與酶結(jié)合的除蛋白方法，作用后的多糖產(chǎn)物在紫外分光光度計(jì)上260-300nm范圍內(nèi)掃描沒有

4、明顯的吸收峰；2）經(jīng)DEAE Cellulose-52和Sephadex G-100層析分析，苯酚-硫酸法顯色檢測(cè)，提取的裙帶菜多糖的主要組分為三種，而且三種組分都沒有拖尾現(xiàn)象，為三種單一的組分；3）將不同濃度的裙帶菜多糖作用于腫瘤細(xì)胞，經(jīng)過MTT實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)證明，多糖對(duì)腫瘤細(xì)胞的存活率有顯著的抑制作用，與對(duì)照組存在差異明顯，多糖能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡，并且與多糖的劑量濃度及作用時(shí)間有密切的依賴關(guān)系；4）多糖能夠下調(diào)凋亡調(diào)控蛋白