連作花生根際微生物區(qū)系分析.pdf

1、花生是我國重要的油料作物和經(jīng)濟作物，山東省的花生種植面積較大。但由于耕地面積有限與市場需求矛盾，導致花生連作現(xiàn)象普遍，連作障礙嚴重。本文以連作花生根際土壤為研究對象，運用平板培養(yǎng)方法和現(xiàn)代分子生物學技術(shù)，對花生根際微生物種群隨著連作年限增加的動態(tài)變化進行了研究。同時對其中的優(yōu)勢微生物進行了分離鑒定。
　　 采用土壤稀釋分離法對連作花生根際中的微生物進行分離，細菌采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，真菌采用馬丁氏瓊脂培養(yǎng)基，放線菌采用高氏一號

2、培養(yǎng)基進行分離，統(tǒng)計土壤樣品中每種微生物的數(shù)量。結(jié)果發(fā)現(xiàn):花生連作后根際中細菌的數(shù)量減少，真菌的數(shù)量增多。與未種花生根際相比，種植花生1年到4年，隨著連作年限的增加，根際中細菌的數(shù)量減少，真菌的數(shù)量增多。種植花生1年，根際中細菌數(shù)量比未種花生土壤減少61％，真菌數(shù)量比未種花生土壤增加30.66％;種植花生2年，細菌數(shù)量減少71％，真菌數(shù)量增加54％;種植花生4年根際中細菌數(shù)量減少71.33％，真菌數(shù)量增加66.67％。但是連作7年后根際

3、土壤中細菌的數(shù)量又有所增加，真菌數(shù)量有所減少。連作后根際中放線菌的數(shù)量變化不明顯，但是與未種花生的根際相比放線菌的數(shù)量顯著減少。
　　 從不同連作年限花生根際中共分離出細菌1278株，真菌2094株，放線菌2152株。從中得到優(yōu)勢細菌10株，優(yōu)勢真菌8株，優(yōu)勢放線菌9株。采用培養(yǎng)性狀、形態(tài)特征、生理生化試驗及16SrDNA序列分析相結(jié)合的方法對分離到的優(yōu)勢細菌和放線菌進行鑒定;采用培養(yǎng)性狀、形態(tài)特征和ITS序列分析相結(jié)合的方法對

4、分離到的優(yōu)勢真菌進行鑒定。
　　 經(jīng)鑒定，未種花生的根際中優(yōu)勢細菌分別為芽孢桿菌屬Bacillussp.、耐鹽節(jié)桿菌Arthrobacterpascens和丁香假單胞菌Pseudomonassyringae，優(yōu)勢真菌為嗜松青霉Penicilliumpinophilum和產(chǎn)紫青霉Penicilliumpurpurogenum，優(yōu)勢放線菌為秋吉鏈霉菌Streptomycesakiyoshiensis和天藍色鏈霉菌Streptomyc

5、escoelicolor;種植1年花生根際優(yōu)勢細菌為Leifsoniaxyli和氯酚節(jié)桿菌Arthrobacterchlorophenolicus，優(yōu)勢真菌為枝狀枝孢菌Cladosporiumcladosporioides和產(chǎn)紫青霉Penicilliumpurpurogenum，優(yōu)勢放線菌為紫紅鏈霉菌Streptomycesviolaceoruber和華麗黃鏈霉菌Streptomycesflaveus;花生連作2年根際中優(yōu)勢細菌為黃色微

6、桿菌Microbacteriumflavescens和鞘氨醇單胞菌屬Sphingomonassp.，優(yōu)勢真菌為哈茨木霉Hypocrealixi和外瓶霉Exophialapisciphila，優(yōu)勢放線菌為Streptomycespanaciterrae和不產(chǎn)色鏈霉菌Streptomycesachromogenes;連作4年土壤中優(yōu)勢細菌為巴氏菌屬Pasteurellasp.和簡單芽孢桿菌Bacillussimplex，優(yōu)勢真菌為微紫青霉P

7、enicilliumjanthinellum和產(chǎn)紫青霉Penicilliumpurpurogenum，優(yōu)勢放線菌為假淺灰鏈霉菌Streptomycespseudogriseolus和纖維素鏈霉菌Streptomycescellulosae;連作7年優(yōu)勢細菌為巨大芽孢桿菌Bacillusmegaterium和Leifsoniaxyli,優(yōu)勢真菌為曲霉Aspergillussp.和大麗輪枝菌Verticilliumdahliae，優(yōu)勢放線菌

8、為Streptomycespanaciterrae和金色鏈霉菌Streptomycesaureus。
　　 連作后花生根際中的優(yōu)勢菌種類有明顯變化。Leifsoniaxyli是種植1年和連作7年花生根際的優(yōu)勢細菌;Penicilliumpurpurogenum是種植1年花生和連作4年花生根際的優(yōu)勢真菌;Streptomycespanaciterrae是連作2年和連作7年花生根際的優(yōu)勢放線菌。其它的優(yōu)勢菌在不同連作年限根際中也能分