茄科蔬菜青枯病菌的PCR檢測(cè)及遺傳多樣性分析.pdf

1、由青枯雷爾氏菌（Ralstonia solanacearum）引起的青枯病是茄科蔬菜作物上的一種毀滅性土傳病害。由于青枯病菌存在豐富的種內(nèi)遺傳多樣性和明顯的致病力分化，給該病的準(zhǔn)確診斷和防治帶來許多困難，至今尚無有效的解決辦法。因此，開展青枯菌的快速診斷技術(shù)研究及其遺傳多樣性研究對(duì)于將來的抗病品種選育和綜合防控具有十分重要的理論指導(dǎo)意義。
　　 本研究從海南省各地茄子、番茄、辣椒作物上分離獲得了47個(gè)青枯病菌菌株，其中12株為海

2、南省不同地區(qū)的菌株，35株為同一塊田地的青枯病菌株。運(yùn)用特異性引物Y2/OLI1對(duì)分離的青枯病菌株進(jìn)行了PCR擴(kuò)增檢測(cè).同時(shí)對(duì)其中一個(gè)菌株的16SrDNA片段進(jìn)行了序列分析。結(jié)果表明，該對(duì)引物從茄子、番茄、辣椒作物上分離的青枯病菌株DNA中擴(kuò)增出了大小約為300bp的特異性片段。 PCR檢測(cè)結(jié)果與16SrDNA片段的測(cè)序結(jié)果一致，證實(shí)該P(yáng)CR檢測(cè)技術(shù)可用作茄科蔬菜青枯病菌的快速準(zhǔn)確的檢測(cè)手段。運(yùn)用REPIR-(I)/REP2-(I)、E

3、RICIR/ERIC2和BOXA1R三對(duì)通用引物對(duì)分離獲得的47個(gè)青枯病菌菌株進(jìn)行了遺傳多樣性分析?；蚪M指紋圖譜分析結(jié)果表明，不僅來自不同地區(qū)的菌株呈現(xiàn)很高的遺傳多樣性，而且來自同一田塊的菌株也表現(xiàn)明顯遺傳多樣性。比較三種引物的指紋圖譜，顯示三種引物都具有較豐富的圖譜多態(tài)性。BOXA1R引物相對(duì)于其他兩種引物產(chǎn)生的圖譜多態(tài)性更多一點(diǎn)。菌株之間豐富的遺傳多樣性表明該菌田間種群結(jié)構(gòu)復(fù)雜多樣，也提示其可能在不利環(huán)境因素的影響下遺傳分化和變異