桑樹乳汁中DNJ的含量測定及其對小鼠降血糖效果研究.pdf

1、乳汁是植物乳汁管分泌的一種特殊物質(zhì)，?？浦参锒鄶?shù)有乳汁。?？浦猩涞娜橹饕械鞍踪|(zhì)、糖、脂肪、生物堿等。桑樹的生物堿-1-脫氧野尻霉素(DNJ)是一種能高效抑制α-葡萄糖苷酶活性，可以用來治療糖尿病的天然產(chǎn)物。桑樹乳汁中DNJ含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于桑樹其它組織，具有重要的研究價(jià)值。本論文以桑樹乳汁為研究對象，對桑樹乳汁中DNJ的提取、含量測定和桑樹乳汁的降血糖效果進(jìn)行了研究分析，為桑樹乳汁的綜合利用提供理論參考依據(jù)。
　　 本實(shí)驗(yàn)采用

2、柱前衍生化反相高效液相色譜-紫外檢測法(RP-HPLC-UV)測定桑樹乳汁中DNJ含量。以70％的乙醇為溶劑提取桑樹乳汁中的DNJ，9-芴甲基氯甲酸甲酯(FMOC-Cl)為衍生化試劑，在pH=8.5的硼酸鉀緩沖液中進(jìn)行衍生化反應(yīng)，生成具有紫外吸收的衍生物DNJ-FMOC，RP-HPLC-UV法測定DNJ-FMOC含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：衍生物DNJ-FMOC的色譜峰分離效果好，DNJ-FMOC的峰面積與DNJ濃度呈線性關(guān)系。RP-HPLC-

3、UV法測定桑樹乳汁中DNJ含量回收率高、重現(xiàn)性好、精密度高、穩(wěn)定性好，說明該方法可靠，可以作為桑樹乳汁、桑樹其它組織和相關(guān)藥物中DNJ含量測定的有效方法。
　　 用RP-HPLC-UV法測定夏季“農(nóng)桑14號(hào)”不同部位乳汁中DNJ含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)桑樹不同部位乳汁中DNJ含量（濕重）有較大差異，其中枝干中部乳汁中DNJ含量最高，達(dá)0.63376％，其次是枝條頂端乳汁，為0.58128％，主干基部乳汁DNJ含量最低，為0.16382％。

4、
　　 測定秋季“湖桑32號(hào)”、“農(nóng)桑8號(hào)”、“農(nóng)桑14號(hào)”、“育71-1”四個(gè)桑樹品種枝干中部乳汁中DNJ含量。結(jié)果顯示：四個(gè)桑樹品種乳汁中的DNJ含量（濕重）有一定差異。含量最高的是“農(nóng)桑14號(hào)”，高達(dá)0.41312％?！昂?2號(hào)”、“農(nóng)桑8號(hào)”、“育71-1”等三個(gè)桑樹品種的乳汁中DNJ含量分別為0.15861％、0.27855％、0.27962％。
　　 分別采集不同季節(jié)的“農(nóng)桑14號(hào)”枝條頂端、枝干中部、主干

5、基部三個(gè)不同部位的乳汁，提取純化乳汁中的DNJ，RP-HPLC-UV法測定其含量（濕重）。結(jié)果表明：四個(gè)季節(jié)都是桑樹枝干中部乳汁中DNJ含量最高，主干基部最低。桑樹枝干中部乳汁在春、夏、秋、冬四個(gè)季節(jié)的DNJ含量差異較大，分別為0.10352％、0.63376％、0.41312％、0.13588％，在夏季最高。桑樹主干基部乳汁中的DNJ含量分別為0.04836％、0.16382％、0.16459％、0.06602％。
　　 分別

6、以0.25ml(DNJ含量為2.0496mg)、0.5ml的桑樹乳汁(DNJ含量為4.0992mg)的劑量灌喂鏈脲佐菌素高血糖小白鼠，比較給藥前后不同動(dòng)物實(shí)驗(yàn)組小白鼠血糖值的下降百分率，桑乳汁灌喂A組(4.0992mg/d)、桑乳汁灌喂B組(2.0496mg/d)、陽性藥物對照組的高血糖小白鼠的血糖值7天后分別下降了22.22％、6.43％、26.8％，14天后分別下降了26.06％、12.27％、21.92％。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：桑樹乳汁對

7、由鏈脲佐菌素(STZ)所致的高血糖小白鼠有顯著的降血糖效果。當(dāng)給高血糖小白鼠灌喂6mg/d的桑樹乳汁時(shí)，七天后桑樹乳汁的降血糖效果已接近陽性藥物對照組（拜糖平）的水平，14天后超過陽性藥物對照組。桑樹乳汁還有抑制糖尿病小白鼠體重減輕的作用，對小白鼠進(jìn)食量及飲水量的增多也有一定的抑制作用。
　　 桑樹乳汁中DNJ的含量測定結(jié)果為探究DNJ在桑樹組織中的分布，以及桑樹乳汁的采集利用提供了重要的理論依據(jù)。桑樹乳汁的降血糖效果為進(jìn)一步開