中華鋸齒米蝦性腺早期分化及卵黃蛋白發(fā)生免疫定位.pdf

1、中華鋸齒米蝦（Neocaridina denticulata sinensis）屬于甲殼綱（Crustacea），十足目（Decapoda），匙指蝦科（Atyidae），新米蝦屬（Neocaridina）。中華鋸齒米蝦為小型經(jīng)濟蝦類，具有廣溫、廣鹽性、繁殖力快、生命力強、生長周期短等特點，是生態(tài)、生理和毒理等實驗的良好材料。
　　 本文采用光鏡和透射電鏡技術觀察了中華鋸齒米蝦的性腺早期發(fā)育和分化過程，采用免疫組織化學技術研究了其

2、性腺發(fā)育過程中卵黃蛋白發(fā)生和積累特征。不僅為中華鋸齒米蝦生殖生物學和環(huán)境生物學的研究提供基礎資料，而且對甲殼動物的生殖發(fā)育調控以及遺傳育種具有重要的理論和實際意義。
　　 中華鋸齒米蝦原始性腺發(fā)生與發(fā)育：
　　 仔蝦孵化第3 天到第6 天為原始生殖細胞遷移和性腺原基形成時期。首先，原始生殖細胞從發(fā)源地沿著消化道和背部動脈遷移。然后，原始生殖細胞和早期間質細胞聚集在背動脈兩側靠近中腸腸道上方處，共同組成生殖嵴。隨后原始生殖

3、細胞不斷增殖，細胞體積明顯增大，性腺原基在腸道上方兩側分化出左右對稱區(qū)域，并出現(xiàn)被膜包圍，被膜的出現(xiàn)標志著性腺原基已經(jīng)基本形成。從原始生殖細胞遷移到性腺原基形成，按照細胞形態(tài)不同可將原始生殖細胞劃分為三個時期：Ⅰ期原始生殖細胞、Ⅱ期原始生殖細胞、Ⅲ期原始生殖細胞。
　　 中華鋸齒米蝦卵巢分化與發(fā)育：
　　 孵化第10 天幼體，卵巢腔形成，卵巢腔中同時存在四種細胞：Ⅲ期原始生殖細胞、原始生殖細胞向卵原細胞過渡的細胞、早期卵

4、原細胞以及一些早期間質細胞分布在卵原細胞周圍。
　　 孵化第13 天幼體，原始生殖細胞消失，卵原細胞體積明顯增大，細胞核核仁明顯，核質比較小。細胞質中細胞器數(shù)目大量增多，存在線粒體、溶酶體、核糖體、高爾基體。
　　 中華鋸齒米蝦精巢分化與發(fā)育：
　　 孵化第23 天幼體，精巢開始出現(xiàn)分化，間質細胞環(huán)繞排列成囊狀，形成早期的精巢，這個時期的精巢還無完整的膜包被，主要存在兩個時期的細胞：Ⅲ期原始生殖細胞和原始生殖細胞

5、向精原細胞過渡時期的細胞。孵化第35 天幼體，此時精巢中原始生殖細胞消失，出現(xiàn)精原細胞且數(shù)目逐漸增多，在精原細胞周圍還有支持細胞包圍。
　　 通過免疫組織化學實驗表明：中華鋸齒米蝦幼體孵化70 天后卵巢中出現(xiàn)卵黃發(fā)生早期卵母細胞（OC2），細胞質中開始出現(xiàn)卵黃蛋白顆粒，卵黃蛋白顆粒均勻的分布在細胞質中。幼體孵化第82 天卵巢中出現(xiàn)卵黃發(fā)生中期卵母細胞（OC3），此時細胞體積明顯增大，細胞質邊緣出現(xiàn)大量的卵黃蛋白球，表明此時為卵黃