巴西橡膠芽接樹砧穗互作的蛋白質(zhì)組學(xué)初步研究.pdf

1、目前巴西橡膠樹栽培中應(yīng)用的主要種植材料是芽接樹。已知砧木對芽接樹生長、產(chǎn)量和抗性等有明顯影響。因此,闡明砧木與接穗間的關(guān)系對于橡膠樹砧木的選擇和應(yīng)用具有重要意義。本文以海墾2(PB86×PR107)和熱研88-13(RRIM600×PiIB84)花藥壁體細(xì)胞組培苗的自接和互接樹為實(shí)驗(yàn)材料,采用蛋白質(zhì)組學(xué)的研究方法,分離并鑒定與橡膠樹砧穗互作相關(guān)的蛋白,為進(jìn)一步闡明橡膠芽接樹砧穗間在蛋白質(zhì)方面的影響機(jī)制打下了基礎(chǔ)。主要研究成果如下:

2、>　　 1.采用TCA-丙酮沉淀法提取不同實(shí)驗(yàn)材料砧木和接穗的膠乳蛋白,運(yùn)用蛋白質(zhì)雙向凝膠電泳技術(shù)分離膠乳蛋白,使用圖譜分析軟件對膠乳蛋白的圖譜進(jìn)行對比分析,再通過MALDI-TOF MS技術(shù)對比較分析得出的差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行鑒定。結(jié)果共鑒定出與砧穗互作相關(guān)的差異蛋白質(zhì)32個(gè),包括:Os05g0105900(RNA結(jié)合區(qū)域核蛋白-1(RNA識(shí)別基序)域含有蛋白質(zhì))、pre-mRNA splicing factor(前體mRNA剪接因子)、

3、methylenetetrahydrofolate dehydrogenase,putative(推測的亞甲基四氫葉酸脫氫酶)、celldivision cycle protein48(細(xì)胞分裂周期蛋白48)、ribophorinⅠ family protein(ribophorinI家族蛋白)、ribosomal protein S8(S8核糖體蛋白)、Os12g0271600(類似肌球蛋白重鏈)基因、transitional end

4、oplasmic reticulum ATPase(過渡時(shí)期內(nèi)質(zhì)網(wǎng)ATP酶,簡稱特爾ATP酶)、hypothetical protein LOC_Os12g24270(假定的反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子蛋白質(zhì))和light-harvesting chlorophyll-a/b protein of photosystemⅠ(光系統(tǒng)Ⅰ的捕光葉綠素蛋白a/b)等。依據(jù)功能分類,這些差異蛋白參與轉(zhuǎn)錄、翻譯、光合作用、細(xì)胞分裂、蛋白質(zhì)合成和膠乳合成等生物學(xué)過程

5、。
　　 2.采用TCA-丙酮沉淀法提取不同實(shí)驗(yàn)材料砧木和接穗的樹皮蛋白,運(yùn)用蛋白質(zhì)雙向凝膠電泳技術(shù)分離樹皮蛋白,使用圖譜分析軟件對樹皮蛋白的圖譜進(jìn)行對比分析,再通過MALDI-TOF MS技術(shù)對比較分析得出的差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行鑒定。共鑒定出與砧穗互作相關(guān)的差異蛋白質(zhì)52個(gè),包括:photosystemⅡ protein33kD(光系統(tǒng)Ⅱ33 kD蛋白)、condensin complex component SMCl(Conden

6、sin復(fù)雜組分SMC41)、Putative mudrAprotein-maize transposon MuDR(推測的穆德拉蛋白-玉米轉(zhuǎn)座子穆德爾)、classⅢperoxidase(第三類過氧化物酶)、maturase K(內(nèi)含子成熟酶)、putativephotoreceptor-interacting protein(光感受器相互作用蛋白)、heat shock factor(熱激因子)、taxadiene synthase(

7、紫杉烯合酶)、theta class glutathione transferase GSTT1(西塔類谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GSTT1缺失的基因))、calcineurin B-like protein9(鈣調(diào)磷酸酶B細(xì)胞樣蛋白)、putative ATP synthase beta subunit(推測的ATP合成酶β亞基)、Oxygen-evolvingenhancer protein1,chloroplastic(不斷增強(qiáng)的氧蛋白1,

8、葉綠體)、phytochrome B(光敏色素B)、peroxidase(過氧化物酶)、mitochondrial F1-ATPase beta subunit(β-亞基的線粒體的F1-ATP酶)、phosphoenolpyruvate carboxylase(磷酸羧化酶)、Ethylene receptor2(乙烯受體2)、pollen-specific profilin3(花粉特異性纖維蛋白3)、FLP1(FPF1-LIKEPROT

9、EIN1)(FPF1樣蛋白1,開花促進(jìn)因子1)、arginase(精氨酸酶)、cytochrome(細(xì)胞色素)和ATP binding protein,putative(推測的ATP結(jié)合蛋白)等。依據(jù)功能分類,這些差異蛋白參與膠乳合成、光合作用、轉(zhuǎn)錄和翻譯、抗逆和機(jī)體代謝等生物學(xué)過程。
　　 3.從樹皮和膠乳中分離、鑒定出的差異蛋白數(shù)量和種類有所不同,但其功能主要與轉(zhuǎn)錄翻譯、光合作用和膠乳合成等有關(guān),由此推斷,砧木與接穗的相互作