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1、本研究旨在土壤中分離出對(duì)多種植物病原真菌具有強(qiáng)烈拮抗作用的放線(xiàn)菌,并對(duì)菌株進(jìn)行鑒定,并對(duì)其抑菌活性物質(zhì)進(jìn)行分離,尋找新型農(nóng)用抗生素的產(chǎn)生菌來(lái)源。
本試驗(yàn)以選擇性腐殖酸培養(yǎng)基為分離培養(yǎng)基,從廣西省龍眼樹(shù)和菩提樹(shù)的根際土壤分離得到37株放線(xiàn)菌,采用管碟法測(cè)定了放線(xiàn)菌發(fā)酵液對(duì)細(xì)菌的抑菌活性,其中有11株放線(xiàn)菌的抑菌圈直徑≥15mm,檢測(cè)這11株放線(xiàn)菌對(duì)番茄早疫病菌,水稻紋枯病菌,黃瓜枯萎病菌,黃瓜褐斑病菌,甜椒菌核病菌五種植物治
2、病真菌的抑菌活性,結(jié)果它們至少對(duì)1種真菌有抑菌作用,對(duì)3種以上真菌有抑制作用的菌株有6株,分別為L(zhǎng)9、P1、P6、P9、P12、P13,其中L9菌株對(duì)5種真菌都有抑菌作用,并且抑菌直徑都在15mm以上。
由于P23菌株的形態(tài)特異性,我們對(duì)其進(jìn)行了分類(lèi)學(xué)鑒定。該菌株為革蘭氏陽(yáng)性菌,嚴(yán)格好氧菌,在ISP3培養(yǎng)基上培養(yǎng)三周,菌絲分支不斷裂,在氣生菌絲上產(chǎn)生直鏈孢子,并產(chǎn)生黑色素。(G+C)mol%為76.6mol%。通過(guò)與來(lái)自G
3、enBank其他16SrRNA序列的初步比對(duì),P23菌株與異壁放線(xiàn)菌屬的已發(fā)表菌種的序列相似性最高,分別為A.cyanogriseusIFO14455T(96.4%),A.spitiensisDSM44848T(96.6%)和A.hymeniacidonHPA177T(98.1%),與相關(guān)屬的其他種的序列相似性不到95%,并在系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)上形成獨(dú)立的分支,進(jìn)一步DNA雜交顯示,P23菌株與A.hymeniacidonis的相似性為46.8
4、%,低于國(guó)際系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)委員會(huì)規(guī)定的70%。該菌株具有異壁放線(xiàn)菌屬典型的化學(xué)生態(tài)學(xué)特征:meso-A2pm為細(xì)胞壁的主要氨基酸;半乳糖,葡萄糖,甘露糖和核糖為細(xì)胞的主要水解糖:iso-和anteiso分支脂肪酸為細(xì)胞的主要脂肪酸;MK-9(H4)為細(xì)胞的主要醌類(lèi)。但該菌株含有更大量的MK-10(H4)和C18:0飽和脂肪酸,并且環(huán)丙烷酸C17:0在異壁放線(xiàn)菌屬的其他種中未見(jiàn)報(bào)道。
通過(guò)表型鑒定,生理生化水平鑒定,化學(xué)分類(lèi)學(xué)鑒
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