重樓根部放線菌的分離、活性研究及Catellatospora paridis新種的鑒定.pdf

1、藥用植物中蘊(yùn)藏著豐富的微生物資源，近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，藥用植物相關(guān)菌株能夠產(chǎn)生與植物相同或類(lèi)似的活性化合物。這些微生物不僅具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤活性，更能夠促進(jìn)植物健康生長(zhǎng)。重樓是一種珍貴的傳統(tǒng)中藥，其藥用價(jià)值源于重樓植株內(nèi)含有甾醇類(lèi)、皂苷類(lèi)、多糖類(lèi)等活性化合物。本研究選取重樓根部（根與根際）作為放線菌分離源，以期發(fā)現(xiàn)新型具有生物活性放線菌，為新的化合物的篩選奠定基礎(chǔ)。
　　本研究在藥用植物重樓植株根部（根與根際）分離得到125株放

2、線菌，通過(guò)形態(tài)特征和培養(yǎng)特性并結(jié)合16S rRNA序列分析，判斷它們分別歸屬于鏈霉菌屬、小單孢菌屬、小鏈孢菌屬和紅球菌屬。其中根際放線菌占總菌株數(shù)目的69％，植物內(nèi)生放線菌占31％。根際放線菌中優(yōu)勢(shì)菌屬為鏈霉菌屬（約50.5％），而小單孢菌屬約占34.7％。根部?jī)?nèi)生放線菌中優(yōu)勢(shì)菌屬為鏈霉菌（約38.1％），其次為小單孢菌屬約占33.3％。在菌株的抑菌活性測(cè)試中發(fā)現(xiàn)有11株放線菌具有抑制真菌活性，其中兩株對(duì)兩種細(xì)菌同時(shí)達(dá)到10 mm以上的

3、抑制效果。并且具有抑菌活性的菌株中根際放線菌的抑菌效果相較內(nèi)生放線菌更加明顯。
　　本研究篩選得到一株具有較好抗真菌活性的鏈霉菌CL-3，其對(duì)14種供試真菌均具有一定抑制作用，抑制率最高達(dá)到80％（黃瓜炭疽病原菌）。經(jīng)小麥種子萌發(fā)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其濃度為1.7×104 cfu·mL-1-1.7×102 cfu·mL-1的孢子懸液對(duì)種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)具有較好的促進(jìn)作用。根據(jù)進(jìn)一步的植物盆栽實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證菌株可以有效促進(jìn)植物生長(zhǎng)。判斷菌株CL-

4、3為一株植物促生菌。
　　本研究對(duì)一株根際放線菌NEAU-CL2T進(jìn)行了多相分類(lèi)學(xué)鑒定。判斷NEAU-CL2T形態(tài)特征與細(xì)胞化學(xué)組分均與小鏈孢菌屬（Catellatospora）的基本特征一致。經(jīng)16S rRNA序列分析發(fā)現(xiàn)，菌株NEAU-CL2T與Catellatospora vulcania NEAU-JM1T的相似度最高(99.5％)，且二者在系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)中形成獨(dú)立分支。然而DNA雜交結(jié)果顯示二者同源性只有62.2％。同時(shí)菌株