壇紫菜品質(zhì)測定條件的優(yōu)化及新品系品質(zhì)分析.pdf

1、本文通過對壇紫菜主要品質(zhì)指標（藻膽蛋白、葉綠素 a、粗蛋白、總氨基酸、游離氨基酸）的測定條件進行優(yōu)化，獲得了準確科學的壇紫菜品質(zhì)測定實驗方法。并以此方法對通過雜交和選育獲得的六個壇紫菜新品系[速長型新品系（Z-17）、優(yōu)質(zhì)型新品系（Q-1）、耐高溫型新品系（Z-26）、薄葉型新品系（Z-61）、耐低氮磷型新品系（9號Ⅳ）和耐低鹽型新品系（8號1）]的不同子代及對照組的品質(zhì)性狀進行分析，為應用品質(zhì)分析技術(shù)進行壇紫菜的種質(zhì)改良和高品質(zhì)壇紫菜

2、新品種的選育奠定了基礎(chǔ)。通過SDS電泳技術(shù)對新品系壇紫菜的蛋白質(zhì)組成進行分析，為進一步在蛋白質(zhì)水平進行壇紫菜種質(zhì)改良與鑒定探索新的途徑。
　　1、新品系測定條件的優(yōu)化：用正交實驗統(tǒng)計方法對壇紫菜的品質(zhì)測定條件進行優(yōu)化分析。結(jié)果如下：藻膽蛋白提取時細胞破壁方式為研磨與反復凍融并用，提取液為0.05mol/L的磷酸鹽緩沖液，提取過程中避免光照，提取所用藻體質(zhì)量為0.010g，提取液經(jīng)過6次反復凍融后進行測定。葉綠素a提取時細胞破壁方式

3、為研磨，提取過程中避免光照，提取所用藻體質(zhì)量為0.010g。粗蛋白測定時最佳藻體用量為0.150g，硫酸用量為10ml?？偘被崽崛〉淖罴言弩w用量為0.050g，提取液在60℃干燥箱中干燥，超純水稀釋3倍后上機分析。游離氨基酸提取的最佳藻體用量為0.010g，采用去離子水作為提取液，在60℃恒溫條件下提取4h。
　　2、速長型新品系（Z-17）的品質(zhì)性狀：4個子代葉狀體的藻膽蛋白含量差異不顯著，且均顯著高于對照組的（68.01±3

4、.33）mg/g，其中藻膽蛋白含量最高為 F4的（123.35±3.69）mg/g，達到對照組藻膽蛋白含量的1.81倍；葉綠素 a的含量均顯著高于對照組，其中F2葉狀體葉綠素a的含量最高，可達（9.78±0.03）mg/g，顯著高于對照組葉綠素a的含量（(6.60±0.36)mg/g），比對照組高出48.18％；粗蛋白含量與對照組差異顯著，其中F1葉狀體的粗蛋白含量最高為（444.95±6.44）mg/g，比對照組高35.71%；總氨基

5、酸含量均顯著高于對照組，且富含人體必需氨基酸，特別是纈氨酸、亮氨酸、賴氨酸等必需氨基酸含量豐富；游離氨基酸總量與對照組差異不顯著，但其中丙氨酸的含量顯著高于對照組，如F4葉狀體中丙氨酸的含量為10.93mg/g，達到對照組的2.24倍。
　　3、優(yōu)質(zhì)型新品系（Q-1）的品質(zhì)性狀：4個子代葉狀體藻膽蛋白和葉綠素a的含量均顯著高于對照組，其中F4葉狀體藻膽蛋白和葉綠素a的含量最高，分別達到（120.06±1.84） mg/g和(10.

6、39±0.08)mg/g，4個子代及對照組的藻膽蛋白和葉綠素 a的含量成正相關(guān)變化。粗蛋白含量均顯著高于對照組，其中F4葉狀體最高可達（444.72±5.30）mg/g，比對照組高35.6％；總氨基酸含量均高于對照組，F(xiàn)4葉狀體總氨基酸總量為（385.31±5.22） mg/g，顯著高于對照組的（288.62±5.73）mg/g，比對照組高33.5%；游離氨基酸中四種呈味氨基酸（天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸和甘氨酸）含量顯著高于對照組。

7、r>　　4、薄葉型新品系（Z-61）的品質(zhì)性狀：4個子代葉狀體在未剪收和第一次剪收時的藻膽蛋白和葉綠素a含量均顯著高于對照組的含量；同一子代粗蛋白含量變化為第一次剪收﹥未剪收﹥第二次剪收，且第一次剪收與未剪收時差別不大，各個子代葉狀體第一次剪收及未剪收時粗蛋白的含量均顯著的高于對照組；4個子代葉狀體在未剪收和第一次剪收時的總氨基酸和游離氨基酸含量顯著高于第二次剪收時的含量，且呈味氨基酸含量豐富。
　　5、耐高溫型新品系（Z-26）

8、的品質(zhì)性狀：各個子代葉狀體的藻膽蛋白和葉綠素 a含量均顯著的高于對照組，其中 F4葉狀體的藻膽蛋白含量最高是（142.29±2.75）mg/g,為對照組的2.09倍，葉綠素a含量也較高，達到（10.51±0.89）mg/g；粗蛋白含量高于或者顯著高于對照組；總氨基酸含量顯著高于對照組，富含人體必需的氨基酸，特別是纈氨酸、亮氨酸、賴氨酸含量豐富，均高于對照組；游離氨基酸總量顯著高于對照組，呈味氨基酸中的天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸含量豐富。在

9、耐高溫實驗中，各項品質(zhì)指標在10d的高溫26℃實驗組和正常21℃實驗組中呈波動變化，而在高溫30℃實驗組中呈遞減變化。
　　6、耐低氮磷型新品系（9號Ⅳ）的品質(zhì)性狀：5項品質(zhì)指標（藻膽蛋白、葉綠素a、粗蛋白、總氨基酸、游離氨基酸）隨著低氮磷培養(yǎng)天數(shù)的增加均呈遞減趨勢，且經(jīng)過低氮磷培養(yǎng)和未經(jīng)過低氮磷培養(yǎng)的藻體品質(zhì)指標有顯著性差異，低氮磷培養(yǎng)10d的藻體5項品質(zhì)指標分別降至正常藻體的32.50%、24.79%、37.72%、40.80

10、%、26.28%。
　　7、耐低鹽型新品系（8號1）的品質(zhì)性狀：F3葉狀體的藻膽蛋白含量較F1、F2高，其中在正常鹽度條件藻體的藻膽蛋白含量最高，為（86.41±0.60）mg/g，略高于在低鹽條件下藻體的藻膽蛋白含量；在鹽度為10的低鹽培養(yǎng)液中培養(yǎng)藻體葉綠素 a含量最高，為（7.52±0.24）mg/g；在正常鹽度條件下培養(yǎng)的F1和F3葉狀體粗蛋白含量略高于在低鹽條件下藻體的粗蛋白含量，其中在正常鹽度條件下培養(yǎng)的F3葉狀體的粗蛋

11、白含量最高，為（390.63±8.53）mg/g；F3葉狀體在正常鹽度培養(yǎng)的藻體總氨基酸含量最高，達到（317.88±16.74）mg/g，鹽度越低，藻體的總氨基酸含量越低；在正常鹽度條件下培養(yǎng)的藻體游離氨基酸含量較高，達到（24.90±0.57）mg/g，略高于對照組的游離氨基酸含量。
　　8、壇紫菜SDS電泳分析：7個壇紫菜樣品共分離出6條明顯的共有條帶，其中16-20KDa處是一條很粗的條帶，其余5個條帶分子量大小依次為：5