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1、可溶性糖含量測(cè)定(蒽酮法)可溶性糖含量測(cè)定(蒽酮法)材料材料儀器:分光光度計(jì)、天平、水浴鍋、大試管、三角瓶、容量瓶100ml、量筒25ml、移液管5ml一支、1ml一支、小漏斗藥品:標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液、準(zhǔn)確城區(qū)無水葡萄糖200mg,放入200ml容量瓶中,加入蒸餾水定容,使用時(shí)稀釋10倍(100ugml)蒽酮試劑:稱取0.1g蒽酮溶于100ml稀硫酸中(76ml濃硫酸稀釋成100ml),貯于棕色瓶?jī)?nèi),冰箱保存,可用數(shù)日。方法方法1、葡萄糖標(biāo)
2、曲管號(hào)項(xiàng)目空白12345標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液ml00.20.40.60.81蒸餾水10.80.60.40.20蒽酮試劑555555將各管搖勻,在沸水浴中煮沸10分鐘,取出冷卻,在620nm波長處比色,以空白調(diào)零點(diǎn),記錄光密度值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。2、樣品中可溶性糖的提取稱取減碎新鮮樣品0.5~1g,放入三角瓶50ml中,再加入25ml蒸餾水,放入沸水浴中煮沸20min,取出冷卻,過濾入100ml容量瓶中,用熱水沖洗殘?jiān)鼣?shù)次,定容至刻度。3、測(cè)定管號(hào)
3、項(xiàng)目空白12345樣品提取液00.50.50.50.50.5蒸餾水10.50.50.50.50.5蒽酮試劑555555在分光光度計(jì)上比色,測(cè)出光密度值,在標(biāo)曲上查出相應(yīng)含糖量(ug)4、結(jié)果計(jì)算可溶性糖含量%=【(糖含量(ug)稀釋倍數(shù))(樣品質(zhì)量106)】100抗壞血酸測(cè)定(抗壞血酸測(cè)定(26二氯酚靛酚法)二氯酚靛酚法)儀器研缽、漏斗、玻璃棒、定量濾紙、滴定管、移液管、容量瓶、三角瓶藥品2%草酸溶液:溶解20g草酸結(jié)晶與200ml水中
4、,然后稀釋至1000ml。200ml0.01%26二氯靛酚鈉溶液:稱區(qū)26二氯靛酚鈉60mg,放入容量瓶中,加熱的蒸餾水100150ml,滴加0.01molL的氫氧化鈉45滴,強(qiáng)烈震動(dòng)10分鐘,冷卻后加水至刻度,搖勻后用精密濾紙過濾于棕色瓶?jī)?nèi),貯于冰箱中備用。有效期一周??箟难針?biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確稱取20mg抗壞血酸,溶于2%草酸溶液中,定容至200ml,混勻,吸取比液10ml,再以2%草酸溶液稀釋定容至200毫升。方法方法樣品處理和提取城
5、區(qū)適量5g樣品置研缽中,加4毫升2%草酸,研磨成勻漿,用玻璃棒將樣品提取液轉(zhuǎn)移到50毫升容量瓶中,殘?jiān)貌菟嵯?3次和提取液一并轉(zhuǎn)入容量瓶中,最后用2%草酸定容至刻度,搖勻過濾,濾液備用??瞻椎臏y(cè)定吸取10ml2%草酸,放入50毫升三角瓶中,用26二氯靛酚鈉溶液滴定至溶液呈粉紅色于15秒內(nèi)部褪色為止,記錄所用滴定液體積(重復(fù)三次,取平均值)。26二氯靛酚鈉溶液滴標(biāo)定吸取標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液10ml,放入50ml三角瓶中,立即用所要標(biāo)定的26
6、二氯靛酚鈉溶液滴定至溶液呈粉紅色于15秒內(nèi)不褪色,記錄用滴定液體積(重復(fù)三次,取平均值)。按下式計(jì)算K值,K=200G20010v10K為1ml26二氯靛酚鈉所能氧化抗壞血酸的質(zhì)量,G為稱取抗壞血酸的質(zhì)量V滴定10毫升抗壞血酸溶液所用去26二氯靛酚鈉的體積與丁丁空白所用體積的差值。樣品測(cè)定吸取濾液10毫升,放入50毫升三角瓶中,立即用要標(biāo)定的26二氯靛酚鈉溶液滴定至溶液呈粉紅色于15秒內(nèi)不褪色,記錄用滴定液體積(重復(fù)三次,取平均值)。結(jié)
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