Kisspeptin-NKB在大鼠下丘腦表達(dá)與血液中含量變化的研究.pdf

1、kisspeptin為視黃酸家族神經(jīng)肽，由腫瘤抑制基因kiss-1編碼合成，主要位于大腦丘腦背內(nèi)側(cè)核，孤束核和延髓腹外側(cè)區(qū)尾部，2003年發(fā)現(xiàn)其參與生殖調(diào)控。神經(jīng)激肽B(neurokininB，NKB)是哺乳動物神經(jīng)系統(tǒng)速激肽(tachykinin)家族的主要成員，廣泛分布于中樞和外周神經(jīng)組織中。最近發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)激肽B對青春期正常功能也有重要的作用。kisspeptin可刺激促性腺激素釋放的研究較多，并得到了大量的證實，與此相比，有關(guān)神經(jīng)

2、激肽B的相關(guān)研究報道卻很少見。本實驗以出生期、幼年期、初情前期、初情期和成年的大鼠為研究對象，采用免疫熒光雙標(biāo)結(jié)合顯微共聚焦方法，探明kisspeptin、NKB在大鼠生長發(fā)育進(jìn)程中下丘腦的定位，研究kisspeptin/NKB在下丘腦時相和空間表達(dá)的變化規(guī)律，并結(jié)合放免、酶聯(lián)免疫分析(ELISA)等方法，檢測睪酮、雌二醇、kisspeptin、NKB在大鼠血液中的含量，為研究kisspeptin、NKB在生長發(fā)育進(jìn)程中的作用及其機(jī)制提

3、供一定的形態(tài)學(xué)依據(jù)。
　　 結(jié)果顯示：(1)kisspeptin在大鼠初情期發(fā)育進(jìn)程中下丘腦的腹內(nèi)側(cè)核、弓狀核和室旁核、視前區(qū)出現(xiàn)不同程度的表達(dá)。①雌性大鼠：kisspeptin在幼年雌鼠下丘腦的腹內(nèi)側(cè)核、弓狀核的表達(dá)強(qiáng)度顯著高于初生期(P<0.05)、發(fā)情前期(P<0.05)、初情期(P<0.05)和成年期(P<0.05)；初情期除室旁核各部位的表達(dá)強(qiáng)度顯著高于初生期(P<0.05)、發(fā)情前期(P<0.05)和成年期(P<0.

4、05)；初情前期和成年期各部位的表達(dá)強(qiáng)度差異不顯著(P>0.05)；幼年期弓狀核的表達(dá)強(qiáng)度最高，腹內(nèi)側(cè)核次之；初情期腹內(nèi)側(cè)核的表達(dá)強(qiáng)度顯著高于弓狀核(P<0.05)、室旁核(P<0.05)和視前區(qū)(P<0.05)。②雄性大鼠：kisspeptin在弓狀核的表達(dá)強(qiáng)度在初情前期時達(dá)到最高，幼年期次之，其次是初情期，成年期表達(dá)強(qiáng)度最弱；幼年期和初情期時，腹內(nèi)側(cè)核的表達(dá)強(qiáng)度差異不顯著(P>0.05)，但均顯著高于初生期(P<0.05)、發(fā)情前期

5、(P<0.05)和成年期(P<0.05)；初情期時，室旁核的表達(dá)強(qiáng)度顯著高于初生期(P<0.05)、幼年期(P<0.05)、發(fā)情前期(P<0.05)和成年期(P<0.05)；初情期時，腹內(nèi)側(cè)核和弓狀核的表達(dá)強(qiáng)度差異不顯著(P>0.05)，但顯著高于室旁核(P<0.05)和視前區(qū)(P<0.05)。(2)NKB的表達(dá)與kisspeptin大體相似，但具體位置不完全相同，總體來說表達(dá)強(qiáng)度要高于kisspeptin。①雌性大鼠：幼年期下丘腦的腹

6、內(nèi)側(cè)核和弓狀核的表達(dá)強(qiáng)度顯著高于初生期(P<0.05)、發(fā)情前期(P<0.05)、初情期(P<0.05)和成年期(P<0.05)；初情期時，腹內(nèi)側(cè)核和室旁核的表達(dá)強(qiáng)度顯著高于初生期(P<0.05)、發(fā)情前期(P<0.05)和成年期(P<0.05)，弓狀核的表達(dá)強(qiáng)度顯著低于初情前期(P<0.05)，高于其他三個時期；初情前期，弓狀核的表達(dá)強(qiáng)度顯著高于腹內(nèi)側(cè)核(P<0.05)、室旁核(P<0.05)；成年時，弓狀核的表達(dá)強(qiáng)度顯著低于腹內(nèi)側(cè)核

7、(P<0.05)、室旁核(P<0.05)。②雄性大鼠：NKB在初情期各部位的表達(dá)強(qiáng)度均顯著高于初生期(P<0.05)、幼年期(P<0.05)、發(fā)情前期(P<0.05)和成年期(P<0.05)；幼年時，弓狀核的表達(dá)強(qiáng)度顯著高于初生期(P<0.05)、發(fā)情前期(P<0.05)和成年期(P<0.05)；初情前期和成年期格部位間的表達(dá)強(qiáng)度差異不顯著(P>0.05)。(3)kisspeptin/NKB在各時期的血清濃度差異不顯著。(4)雌二醇的含

8、量在初生及幼年時非常低，在初情前期時達(dá)到最高，隨后逐漸下降；睪酮在幼年及初情前期時含量最低，且兩者之間差異不顯著(P>0.05)，而在成年時含量最高，其次是初情期。
　　 根據(jù)以上結(jié)果得出結(jié)論：(1)kisspeptin在雌鼠幼年期和初情期出現(xiàn)高強(qiáng)度表達(dá)，在雄鼠，初情前期弓狀核、初情期各部位表達(dá)強(qiáng)度均較高?？傮w來說，kisspeptin在雌鼠下丘腦的表達(dá)強(qiáng)度高于雄鼠，提示，kisspeptin在調(diào)控大鼠生殖啟動的時間上存在性別差

9、異。(2)NKB在雌鼠和雄鼠下丘腦的表達(dá)強(qiáng)度差異不顯著，均在幼年和初情期出現(xiàn)高強(qiáng)度表達(dá)，但在雄鼠初情期的表達(dá)強(qiáng)度高于幼年，提示，NKB在調(diào)控大鼠生殖啟動的時間上存在一定的性別差異。(3)kisspeptin/NKB在大鼠生長發(fā)育進(jìn)程中血清中的含量無顯著的變化趨勢，提示kisspeptin/NKB主要在下丘腦表達(dá)并發(fā)揮作用。(4)雌二醇在雌鼠初情前期含量最高，隨后逐漸下降，kisspeptin后三個時期變化趨勢與之大體相反，但并不嚴(yán)格；睪