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文檔簡介
1、棗樹在中國有著悠久的栽培歷史,河南又是最早栽培棗樹的地區(qū)之一.為了選育優(yōu)質(zhì)豐產(chǎn)的棗樹品種,新鄭棗樹科學(xué)研究所篩選了5株棗樹優(yōu)良單株,為了探索早期鑒定優(yōu)良單株的方法,本論文選用一種簡便、快速、可靠的分子標(biāo)記-ISSR技術(shù),探討其在優(yōu)良單株早期鑒定方面的應(yīng)用.其結(jié)果如下: 1、改良了棗樹葉片DNA的提取方法,提取出高質(zhì)量的棗樹基因組DNA,適用于ISSR擴(kuò)增. 2、對棗樹ISSR反應(yīng)體系進(jìn)行了優(yōu)化,總體積15μl,引物濃度為
2、0.8μmol/L,2×TaqMastcrMix 7.5μll,45ngDNA.擴(kuò)增反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性5min;94℃變性1min;50℃左右退火(隨引物不同變化)1mln;72℃延伸2mln;72℃延伸10min;40個(gè)循環(huán);4℃保存. 3、從100條ISSR引物中篩選出15條條帶清晰、多態(tài)性豐富的引物用于基因組DNA擴(kuò)增,得到93條條帶,其中多態(tài)性條帶83條,占89.3%. 4、對5株優(yōu)良單株的ISSR數(shù)據(jù)進(jìn)行
3、了相似系數(shù)和聚類分析,并建立了5個(gè)優(yōu)良單株的樹狀聚類圖,品種之間的相似系數(shù)在0.43-0.81之間,以相似系數(shù)0.60為界,可以將5株優(yōu)良單株分為兩大類,1-4號為第一類,5號為第二類. 5、根據(jù)5株優(yōu)良單株的形態(tài)指標(biāo),運(yùn)用最短距離法進(jìn)行聚類分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)運(yùn)用與ISSR的結(jié)果并不完全一致,不同之處在于ISSR法將3號和4號先分為一個(gè)亞類,1號和2號也分為一個(gè)亞類,然后再將它們四種分為一類.但是傳統(tǒng)方法是先將1號、2號、3號分為一
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