海參養(yǎng)殖水體病原微生物生物治理技術(shù)研究.pdf

1、近年來,隨著海參養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大,養(yǎng)殖海參的細(xì)菌性病害已成為海參養(yǎng)殖業(yè)面臨的最為突出和亟待解決的問題。目前,使用抗生素是抑制海參細(xì)菌性病害的有效方法,但是抗生素藥物的大量使用帶來的不良影響日益嚴(yán)重。蛭弧菌(Bdellovibrio)對(duì)革蘭氏陰性細(xì)菌具有特異且廣泛的裂解能力,從而殺滅致病細(xì)菌微生物、凈化水體。蛭弧菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用研究同益受到重視,蛭弧菌作為微生態(tài)制劑有著無毒害,無副作用,效果穩(wěn)定等特點(diǎn)。利用蛭弧菌取代抗生素、控制病原

2、菌,顯示了巨大的市場(chǎng)需求。分離鑒定海水養(yǎng)殖水體的致病微生物,考察蛭弧菌對(duì)宿主的裂解及裂解條件,對(duì)于海參等海珍品養(yǎng)殖水體凈化,具有重要的理論意義和價(jià)值。
　　 本文從8個(gè)樣品中分離細(xì)菌57株,觀察鏡下形態(tài),并進(jìn)行了革蘭氏染色鑒定。對(duì)部分菌株進(jìn)行了16srDNA測(cè)序,經(jīng)序列比對(duì)表明,它們分別為柴油食烷菌(Alcanivoraxdieselolei):Alcanivoraxsp.C13、AlcanivoraxdieseloleiH34

3、、假單胞菌屬(Pseudomonassp):PseudomonasmarincolaH36、PseudomonasmarincolaH37、海洋屈撓桿菌(Tenacibaculumsp.):Tenacibaculumsp.B4、希瓦氏菌(Shewanellabaltica):ShewanellabalticaS55,迪茨氏菌(Dietzianatronolimnaea):DietzianatronolimnaeaHong、蠟樣芽孢桿菌(

4、Bacilluscereus):BacilluscereusB7、BacilluscereusB8。最大相似性(98%以上)。其中海洋屈撓桿菌、希瓦氏菌與假單胞菌經(jīng)查閱文獻(xiàn)證實(shí)與海參表皮腐爛病相關(guān),系海參養(yǎng)殖致病微生物。
　　 考察了蛭弧菌BdeD23對(duì)部分海參養(yǎng)殖水體中分離細(xì)菌的裂解;考察了不同溫度、培養(yǎng)條件,分別為靜止培養(yǎng)(分別在30℃和37℃下)、搖床培養(yǎng)(分別在30℃和37℃下),BdeD23對(duì)E.coliJM109裂解

5、效果。以37℃搖床培養(yǎng)方式OD600值下降最大,即蛭弧菌對(duì)于宿主菌的裂解效果最明顯。本文還考察了BdeD23在不同NaCl濃度下對(duì)E.coliJM109的裂解,NaCl濃度在低于0.5%或高于3%的情況下,均無法形成溶菌斑,在1%NaCl下,出斑耗時(shí)最短(63h),溶菌斑擴(kuò)展速度最快。
　　 本研究對(duì)海參養(yǎng)殖微生物病害的蛭弧菌殺滅技術(shù)進(jìn)行了初步探索,證實(shí)了蛭弧菌對(duì)于海參養(yǎng)殖病害微生物的裂解作用,同時(shí)確定了蛭弧菌裂解宿主菌的限制因