微囊藻毒素誘導(dǎo)小白菜氧化脅迫機(jī)制與毒素降解酶的基因克隆及分析.pdf

1、微囊藻毒素(Microcystins-LR)對(duì)小白菜的生長(zhǎng)具有毒害效應(yīng),本文主要研究了微囊藻毒素對(duì)小白菜所產(chǎn)生的脅迫效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)用不同濃度MC-LR粗提液(0.025、0.1、0.4、1.6和6.4 mg/L)處理小白菜幼苗,結(jié)果表明,從0.1mg/L處理開始受到顯著抑制;濃度為4.23 mg/L的MC-LR處理5天使小白菜幼苗株高減少50％;并以此濃度處理小白菜幼苗,MC-LR處理能夠誘導(dǎo)小白菜幼苗葉片活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)

2、含量增加以及抗氧化酶基因(Cu/Zn-SOD、APX、CAT)的轉(zhuǎn)錄水平顯著升高。
　　 通過一氧化氮熒光探針檢測(cè)小白菜幼苗葉片內(nèi)源一氧化氮的積累,發(fā)現(xiàn)在MC-LR脅迫下硝酸還原酶抑制劑的添加可降低小白菜幼苗葉片一氧化氮合成,由此可推斷在MC-LR脅迫下,硝酸還原酶(NR)途徑是NO產(chǎn)生的主要途徑。同時(shí),應(yīng)用ROS熒光染色技術(shù)分析經(jīng)NR抑制劑NaN3及MC-LR共同處理的小白菜幼苗葉片,發(fā)現(xiàn)小白菜幼苗遭受MC-LR脅迫時(shí),內(nèi)源氣

3、體分子NO信號(hào)處于ROS信號(hào)的上游,且NaN3能顯著緩解MC-LR單獨(dú)處理引起的氧化脅迫反應(yīng)。如小白菜幼苗超氧化物歧化酶(SOD)、抗壞血酸過氧化物酶(APX)和過氧化氫酶(CAT)活性的上升以及抗氧化酶基因(Cu/Zn-SOD、APX、CAT)轉(zhuǎn)錄水平的顯著升高。上述結(jié)果表明,微囊藻毒素MC-LR通過NO引起小白菜幼苗的氧化脅迫反應(yīng)。
　　 此外,利用PCR技術(shù)從微囊藻毒素降解菌EMS(Stenotrophomonas sp.