PARP在植物體內(nèi)的功能研究.pdf

1、熨11_人學(xué)研火聲l三學(xué)位論文目錄第一部分PARP在植物體內(nèi)的功能研究.........................................................……111摘要......................................................................................................................……1

2、11ABSTRACT..........................................................................................................……IV文獻(xiàn)綜述................................................................................................

3、.................……11.1PARP概述...........................................................................……，.......................................……l1.1.1PAR鏈的合成及其降解.......................................................

4、...............……11.1.2PARP家族............................................................................................……21.1.3PARP的功能.....................................................……，............................

5、……51.2根的概述..............................................................................……，........................................……71.2.1根的形態(tài)解剖學(xué)..........................................................................

6、...........……71.2.2側(cè)根發(fā)育研究進(jìn)展.................................................................................……9材料與方法一.......................................................................................................

7、..……162.1實(shí)驗(yàn)材料..........................................................................……、.........................................……162.1.1植物材料............................................................................

8、...................……162.1.2菌種.......................................................................................................……162.1.3質(zhì)粒............................................................................

9、...........................……162.2試劑和培養(yǎng)基.....................................................……，.....……、..........................................……162.2.1主要試劑和耗材..........................................................

10、........................……162.2.2培養(yǎng)基.................................................................................................……，.172.3實(shí)驗(yàn)方法..........................................................................

11、.................................................……172.3.1植物培養(yǎng).............................................................................................……，.172.3.2常用分子克隆實(shí)驗(yàn)技術(shù)............................................

12、...........................……18結(jié)果與分析...........................................................................................................……2626262727293.1PARP的生物信息學(xué)分析3.1.1PARP的進(jìn)化分析:3.1.21〕ARP一1、PARP一2、PARP一3的序列比對(duì)3.

13、23.33.4隊(duì)RP一1與隊(duì)RP一2存在相互作用隊(duì)RP一1和PARP一2的表型分析...……PARP活性被抑制后的表型觀察.，.............................................……，.....................……314.13一AB促進(jìn)擬南芥?zhèn)雀l(fā)育...................................……‘.....................……314.23一

14、AB促進(jìn)擬南芥鮮重增加...............................................................……31，J氣」3.4.34.43一AB處理的擬南芥比未處理的顯示出史抗旱性............……、........……犯PA即其他抑制劑對(duì)擬南芥?zhèn)雀l(fā)育的影響...................................……344.5在煙草、玉米中，3一ABBA也促進(jìn)了側(cè)根生

15、長(zhǎng)和發(fā)育...................……35氣J氣」207苦，J內(nèi)」3.53.6PARP一1、PARP一2根部表達(dá)分析隊(duì)RP一1過(guò)表達(dá)分析..................……3.7基因毒劑影響隊(duì)RG一1的根的發(fā)育........................................................................……38父!I人學(xué)研兒‘1’、少位淪文第一部分PARP在植物體內(nèi)的功能

16、研究摘要多聚ADp核糖聚合酶(polyADp一ribosepolymerase，pARp)是廣泛存在于除酵母以外真核細(xì)胞中的蛋白質(zhì)翻譯后修飾酶。它以NAD為底物，在蛋白質(zhì)上連上多聚ADP核糖分子，從而改變蛋自質(zhì)的生理生化活性。擬南芥中有三個(gè)只峨R尸基因，其中PAR尸一j和PAR尸一2位于細(xì)胞核中。酵母雙雜交發(fā)現(xiàn)PARP一1可以與PARP一2發(fā)生相互作用，由于未能鑒定出PAR尸J和剮R尸一2的knockout突變體，我們采用PARP抑制劑

17、3一AB來(lái)研究PARP在體內(nèi)的作用，發(fā)現(xiàn)擬南芥在含有3一AB的培養(yǎng)基上根系發(fā)達(dá)，側(cè)根數(shù)目大大高于對(duì)照植物，利用GUS報(bào)告基因分析發(fā)現(xiàn)PAR尸一I基因在擬南芥幼苗根的基部表達(dá)，而此處正是側(cè)根發(fā)生處，據(jù)此我們初步推測(cè)PAR尸一I可能在體內(nèi)調(diào)控了植物的側(cè)根發(fā)生。本研究還首次發(fā)現(xiàn)PA即抑制劑3一AB不僅促進(jìn)了擬南芥?zhèn)雀l(fā)達(dá)、鮮重增加，而月.還提高了擬南芥的抗旱能力。干旱實(shí)驗(yàn)表明經(jīng)3一AB處理過(guò)的擬南芥的抗旱能力明顯強(qiáng)于對(duì)照，3一AB的類似物BA